阪崎肠杆菌及实时荧光定量PCR检测
一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种:
1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50% 以上。目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。例如，味全配方奶粉2008年年10月份被检出含有致病菌阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%～80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点。但是国内企业鲜有自查能力,原因是国内以前还没有专门的检测手段,而去买一套以前国内从未有过的检测设备也不是马上就可办到的。目前,国外 奶粉(乳)制品巨头却拥有检测手段,惠氏中国宣称保证在中国销售的每一个产品都经过了阪崎肠杆菌的检测才上市。同样宣称设有此检测设备的企业还有美赞臣中国公司。
在国外发现的奶粉中的阪崎肠杆菌并非有其特定的区域局限性，中国奶粉企业又面临一项大难题。
2005年5月20日，由中国检验检疫科学研究院和天津出入境检验检疫局牵头完成的《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准在京通过了审定。这项标准的出台，解决了我国检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无标准、无检测方法的问题。10月该标准被实施。
该标准建立了阪崎肠杆菌的改进的传统检测方法、普通PCR方法和荧光PCR方法。
据了解，阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”，已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌，可导致任何年龄层人群的疾病，尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大，严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。
继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定，对奶粉严查此菌。
今年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。
二、控制阪崎肠杆菌危险的几点建议
(1)制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准，建立有效控制措施，将其危险性降低到最低。
(2)制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则，研究降低阪崎肠杆菌污染水平的方法，在生产环境和配方奶粉中降低阪崎肠杆菌的浓度和流行的危险性；为高危人群生产较大比例的商业无菌配方替代产品。
(3)制定有效的环境监测计划，将肠杆菌科而不是大肠杆菌作为工业生产线的卫生指标菌。
(4)建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径等进行调查研究；加强相关学科的基础研究，包括生态学、分类学、菌株毒力等。
(5)用商业无菌液体或开水冲调配方食品，喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存，并在食用前再加热。我国应根据实际情况制定相应管理办法，加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制技术研究，进一步完善婴幼儿配方食品标准，以保证我国广大婴幼儿群体的健康与安全。
三、阪崎肠杆菌检测必备仪器--荧光pcr仪：
实时荧光定量PCR检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System)，简称实时荧光qPCR，qPCR的核心是实时荧光定量PCR仪及与其配套的检测分析软件系统。
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction简称PCR)原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势，因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快，成为分子生物学诊断的主流，至今仍处于学术和应用前沿，发展至今已有三代产品：第一代PCR定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪(DNA Thermal Cycler)+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成；第二代PCR-DNA终点定量技术及设备(End-point quantitative PCR detection)由基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂构成，其又分为终点酶免定量(End-point ELISA-PCR)和终点荧光定量(End-point Flour-PCR)两种；第三代产品为Real-time qPCR-DNA/RNA实时荧光定量检测。
qPCR检测灵敏度高，检测线性范围宽，检测精度和重复性好等突出优势，因此被公认为目前世界用于临床及科研的最先进核酸分子诊断技术，被美国FDA承认并推崇。检测项目包括：食物等病原菌以及疾病病毒等病原体如：乙肝病毒HBV DNA，丙肝病毒HCV RNA，艾滋病病毒HIV RNA，沙眼衣原体CT，淋病双球菌NG，巨细胞病毒CMV，结核分支杆菌Mtb、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等。
PCR仪的应用范围广，几乎所有的生命科学领域都要涉及：食品检测、临床检验、疾病控制、检验检疫、科研实验室、食品安全、化妆品检测、环境卫生等。国内多家试剂厂商生产了包括肝炎、性病、优生优育、呼吸道疾病、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量PCR试剂盒，购买方便，价格便宜，并获得了国家相关认证。
值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量PCR技术的实际应用，国内外已将实时荧光定量PCR检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如：
SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光PCR方法
GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT-PCR 检测方法
GB/T 19438.2-2004 H5 亚型禽流感病毒荧光RT-PCR 检测方法
ISO22174-2005 食物病原体PCR检测方法
相对于价格十分昂贵的进口仪器，选择质量性能与进口仪器相当而售价只有进口仪器三分之一甚至五分之一的优质国产荧光定量PCR仪是国内绝大多数用户的必要选择，也是国家卫生主管部门、国家卫生部临床检验中心以及国家食品药品监督管理局提倡的；使用质量性能与进口仪器相当的国产荧光定量PCR仪能为国家节省大量外汇，使更多的用户能够拥有先进的实时荧光定量PCR技术和设备，同时还能促进国产仪器的技术进步、民族产业的发展，利国利民。
西安天隆科技有限公司生产的TL988型实时荧光定量PCR仪经过国家药监局指定的、具有国家质量检验检疫局认定的具有CNAL全球互认检测资质的检测中心检测合格，性能达到同类产品国际先进水平，并通过两家国家药物临床基地临床试验，获得了国家食品药品监督管理局SFDA核发的医疗器械注册证，并符合国家卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理规范》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》。
2005年至今我国科研人员围绕着阪崎氏肠杆菌的分类、致病机理、危害评估、减少污染措施、检测方法仪器和标准等进行了研究，相关研究论文包括：
阪崎肠杆菌的生物学性状与健康危害，裴晓燕，刘秀梅， 中国疾控制中心营养与食品安全所
乳制品中的阪崎肠杆菌可致婴儿死亡，中国食品产业网 2008年5月28日10:56
乳品检测中实时荧光定量PCR仪的研制，彭年才，苏明权，张镇西，中国乳品工业，CN23-1177/TS200705：62-64；
乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才，李明，食品安全导刊，CN11-5478/R 2008.07；
婴儿奶粉中阪崎肠杆菌及其检测，彭年才，张镇西，苏明权，中国乳业，CN 11-4768/S，2008.08。
浅析乳品中高危害食品源性致病菌阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才 内蒙古乳业 P18-20, 2008，03
