脂溶性维生素样品检测方法对比
针对液相色谱仪的众多优点,大多数文献中都采用反相色谱法。它包括短链烷基(如C8)反相系统和长链烷基(如C18)反相系统。其中C18柱应用较为广泛,综合短链烷基键合和长链烷基键合的众多特征可得出使用C18柱对脂溶性维生素分离是一种较好的方法。脂溶性维生素常用的检测方法有液相色谱与紫外检测器(包括二级管阵列检测器DAD)、荧光检测器、电化学检测器。
液相色谱-紫外检测器联用(LC-UV) UV是液相色谱中应用zui广泛的一种检测器,其灵敏度较高、噪音低、线形范围宽,对流速和温度的波动不灵敏,适用于制备色谱。由于可变波长紫外检测器可选择的波长范围很大,即能提高检测器的选择性,又可选用组分的zui灵敏吸收波长进行测定,从而提高了检测的灵敏度。因此,用LC-UV测定脂溶性维生素,可以随意选择吸收波长的范围,提高了工作人员的工作效率。
液相色谱-荧光检测器联用(LC=FD) FD是一种具有高灵敏度和高选择性的检测器,FD的灵敏度比紫外吸收检测器高100倍,对痕量组分检测时,是一种的检测工具。但其线性范围较窄,测定中不可使用能熄灭、抑制或吸收荧光的溶剂做流动相,对不能直接产生荧光的物质,要使用色谱柱后衍生技术,操作比较复杂。所以,在测定脂溶性维生素时,UV比FD测定更快速。
液相色谱-电化学检测器联用(LC-ECD) EDC的灵敏度很高,应用范围广,尤其适合于痕量组分的分析。凡具有氧化还原活性的物质都能进行检测,不具有氧化还原活性的化合物必须进行衍生化后,方可进行电化学检测。一般在使用ECD注意流动相必须能导电;流动相必须连续不断地除气;选适当的外加电位,提高检测器的选择性和稳定性;流速和温度需十分稳定。虽然国内、外有ECD测定脂溶性维生素的相关报道,但ECD干扰因素较多,操作起来比UV复杂,影响工作效率。
综上所述,结合LC-UV的可行性,利用LC-UV检测脂溶性维生素应是。
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