蛋白聚集体的检测

1. 可溶聚集体

最小的可溶聚集体是二聚体,可溶聚集体的大小上限则因蛋白质和溶液条件而异。这些可溶的蛋白聚集体,无论是通过物理相互作用还是化学修饰,通常可以用SEC-HPLC检测。该方法的局限在于样品在层析柱中的稀释可能会导致聚集体的解离、不同蛋白质需要不同的流动相、同时流动相或高压也可能会诱导蛋白质形成聚集体。

除此之外,其他的一些可以检测蛋白质聚集体的方法有原位动态光散射、原位静态光散射、分析超离心法、原子力显微镜、石英晶体微天平、电喷雾-差分电迁移率分析等。

2. 不可溶聚集体

一般来说,不可溶聚集体包括亚可见微粒(<100 μm)和各种形式的可见聚集体或颗粒。可见颗粒体/聚体的形貌取决于聚集机制和或实验条件(如溶液pH)。

传统的检测亚可见微粒的方法是光屏蔽法,但其在检测半透明颗粒和特征尺寸小于2 μm的颗粒方面能力有限。流动成像分析因为其高的灵敏度、形态信息及可区分某些类型的颗粒而被广泛应用于聚集体的检测。