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酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液
1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 酪蛋白激酶分析缓冲液 4 μl β-酪蛋白 1 μl[γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP) 1 μl水(取决于下一步所加的激酶样品的量) 0~14 μl10 mg/ml β-酪蛋白储存液5X 酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ分析缓冲液:100 mmol/L Tris-HCl,30℃ 时(pH 7.5)25 mmol/L MgCl22.5 mmol/L DTT750 mmol/L KCl2. 加入 1~14 μl 激酶样品开始反应。3. 于 30℃ 继续反应一定时间。4. 分析反应产物。
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