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用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶

2019.4.05
试剂、试剂盒

酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液

实验步骤

1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:

5X 酪蛋白激酶分析缓冲液                            4 μl  

β-酪蛋白                                                     1 μl

[γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP)   1 μl

水(取决于下一步所加的激酶样品的量)       0~14 μl

10 mg/ml β-酪蛋白储存液

5X 酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ分析缓冲液:

100 mmol/L Tris-HCl,30℃ 时(pH 7.5)

25 mmol/L MgCl2

2.5 mmol/L DTT

750 mmol/L KCl

2. 加入 1~14 μl 激酶样品开始反应。

3. 于 30℃ 继续反应一定时间。

4. 分析反应产物。

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