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毛细管区带电泳色谱仪工作原理

2019.12.23

毛细管区带电泳色谱仪(CZE)的整个系统采用同一种缓冲液充满,以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异进行分离,是CEzui基本、应用最广的分离模式。

CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管中,由于电渗流的存在,所有粒子都随电渗流一起向负极迁移,电渗流速度约是一般离子电泳速度的57倍。各种电性粒子在毛细管中的迁移速度分别为:

1阳离子vap = veo+ vep,阳离子电泳方向与电渗流方向一致。

2阴离子vap = veovep,阴离子电泳方向与电渗流方向相反。

3中性粒子vap = veo,中性粒子运动方向与电渗流方向一致。

当样品从阳极端注入毛细管时,不同电性的粒子将按不同速度向负极迁移,从负极端先后流出毛细管,出峰顺序依次是阳离子、中性粒子和阴离子。中性粒子无电泳现象,随电渗流同行在阳离子后流出,但不同结构的中性粒子无法相互分离(电泳图上是一个峰)。

电渗流在CZE中起着极其重要的作用:

1电渗流具有象HPLC中泵一样的作用,推动粒子前进,加上不同粒子电泳速度和方向的差异,完成阳离子、阴离子和中性粒子的分离。

2改变电渗流速度的大小和方向,可改变分离效率和选择性。这是CZE优化分离的重要因素。

3电渗流速度的微小变化会影响分离结果的重现性(迁移时间和峰面积)。


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