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高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求

2020.1.09

高效液相色谱(HPLC)流动相溶剂具有粘度低、与检测器相容性好、产品易得、毒性低等特点。

选择填料(固定相)后,强溶剂对填料表面溶质的吸附降低,相应的容量因子K降低。然而,较弱的溶剂增加了溶质在填料表面的吸附,相应的容量因子k也增加了  因此,k值是流动相组成的函数  塔板数n通常与流动相的粘度成反比  因此,选择流动相时应考虑以下方面:

(1)流动不会相应地改变填料的任何性质  低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。

(3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收或吸收很少在使用差分折射率检测器时,应选择具有较大折射率和样品的溶剂作为流动相,以提高灵敏度。

(4)低粘度和高粘度的溶剂会影响溶质的扩散传质降低塔效率增加塔压降延长分离时间,流动相沸点低于100℃时的最佳选择

(5)样品的溶解度应合适  如果溶解性差,样品将沉淀在柱头上,这不仅影响纯化和分离,而且使柱劣化。

为便于样品回收,应选用6种易挥发溶剂。


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