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人抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒分析检测说明

2020.5.27

本试剂盒仅供研究使用。

    检测范围:48T25ng/L-800ng/L

    使用目的:

    本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关本试剂盒仅供研究使用。

    检测范围:48T25ng/L-800ng/L

    使用目的:

    本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗内因子抗体(IFA)含量。

    实验原理

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗内因子抗体(IFA)水平。用纯化的人抗内因子抗体(IFA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗内因子抗体(IFA),再与HRP标记的抗内因子抗体(IFA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗内因子抗体(IFA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗内因子抗体(IFA)浓度。

    试剂盒组成

    1.30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶;2.酶标试剂6ml×1瓶

    3.酶标包被板12孔×8条;4.样品稀释液6ml×1瓶

    5.显色剂A液6ml×1瓶;6.显色剂B液6ml×1/瓶

    7.终止液6ml×1瓶;8.标准品(48ng/ml)0.5ml×1瓶

    9.标准品稀释液1.5ml×1瓶;10.说明书1份

    11.封板膜2张;12.密封袋1个

    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.温育:操作同3。

    8.洗涤:操作同5。

    9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    ELISA试剂盒的优势:

    全面——混合8种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。

    快速——检测时间短(~2小时),确诊时间更早。

    准确——ELISA检测方法,灵敏度高,特异性强,适用性好。

    质优——美国技术开发,高品质及高可靠性的分析性能。

    价低——国内自生产,符合国内实情,降低生产成本。

    Elisa试剂盒组织结构:

    1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

    2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

    3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

    4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。

    5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    注意事项:

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

    保存条件及有效期

    1.试剂盒保存:;2-8℃。

    2.有效期:6个月

    液体样本抗内因子抗体(IFA)含量。

    实验原理

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗内因子抗体(IFA)水平。用纯化的人抗内因子抗体(IFA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗内因子抗体(IFA),再与HRP标记的抗内因子抗体(IFA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗内因子抗体(IFA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗内因子抗体(IFA)浓度。

    试剂盒组成

    1.30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶;2.酶标试剂6ml×1瓶

    3.酶标包被板12孔×8条;4.样品稀释液6ml×1瓶

    5.显色剂A液6ml×1瓶;6.显色剂B液6ml×1/瓶

    7.终止液6ml×1瓶;8.标准品(48ng/ml)0.5ml×1瓶

    9.标准品稀释液1.5ml×1瓶;10.说明书1份

    11.封板膜2张;12.密封袋1个

    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.温育:操作同3。

    8.洗涤:操作同5。

    9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    ELISA试剂盒的优势:

    全面——混合8种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。

    快速——检测时间短(~2小时),确诊时间更早。

    准确——ELISA检测方法,灵敏度高,特异性强,适用性好。

    质优——美国技术开发,高品质及高可靠性的分析性能。

    价低——国内自生产,符合国内实情,降低生产成本。

    Elisa试剂盒组织结构:

    1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

    2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

    3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

    4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。

    5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    注意事项:

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

    保存条件及有效期

    1.试剂盒保存:;2-8℃。

    2.有效期:6个月


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