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血清补体C4的注意事项及检查过程

2022.2.20

  注意事项

  (1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。

  (2)加样后马上电泳,且标本不要太多,以防止峰形变宽。

  (3)C4不很稳定,在4℃贮存2周或―20℃60d均可使C4值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。

  检查过程

  (1)制备抗体琼脂糖板:取已融化的10.0g/L琼脂糖凝胶与适当浓度的抗C4血清混合,浇板(8cm×8.5cm),待冷却凝固后打孔。

  (2)在距一边1cm处打孔8个,孔径为3mm,孔间距5mm,挑去孔内琼脂糖。

  (3)各孔内分别加入1∶4稀释的待检血清和不同浓度的C4参考血清10μl。以三层滤纸为桥,置0.025mol/L pH8.6巴比妥缓冲液的电泳槽内进行电泳,将有孔的一端连接阴极,端电压3~4V/cm,电泳4~5h后,关闭电源,取下琼脂板测量。

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