Masson染色
实验概要
Masson染色由mallory三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成份显示出来。主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
主要试剂
1. Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml,将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用;
2. Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml;
3. 0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml;
4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml;
5. 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml;
6. 1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
实验步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水;
2. 铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略);
3. 依次自来水和蒸馏水洗;
4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min;
5. 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化;
6. 蒸馏水洗;
7. 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min;
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min;
10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min;
11. 以0;2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
12. 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。