化学发光免疫分析室内质量控制的体会
作者单位：江苏省无锡市人民医院检验科,江苏无锡214023
我科在2003年5月引进Access全自动微粒子化学发光免疫分析仪，该仪器由美国BECKMAN COULTER公司和法国PASTURE研究院合作设计生产，采用磁性微粒子分离和酶放大化学发光分析技术，具有方法学先进、精密度高、准确性好、测试速度快、配套试剂有效期长、软件设计合理、人机对话操作方便等优点，深受广大用户好评。该仪器主要用于甲状腺功能、性腺激素及其他内分泌激素的检测，使分析质量和检测效率得以大幅提高。虽然自动化分析系统有效降低了手工操作、反应条件等造成的误差，但是影响检测结果的因索是多方面的，进行严格的质最控制是必要的。质控分为室内质控和室间质控，前者是基础。应包括从标本采集储存、仪器维护、分析检测到报告审核的全过程。本文作者根据多年实践经验就日常工作中如何保证检测质量阐述如下。
l标本的采集与保存
1.1 采血时间的选择一般采血时间以早晨空腹为宜，需经常复检者应尽莓固定每次采血时间。具有昼夜节律性的激素应注明采血时间，如Cortisol、ACTH、PRL、睾酮等；女性激素如E：FSH、LH、P等应注意月经周期的变化；呈脉冲分泌的垂体激素如PRL、GH、ACTH等可采用间隔15分钟分三次抽血后分别检测。
1.2标本的分离与贮存一般标本采血后置室温下待血清自然析出后分离血清，室温较低时可放水浴箱孵育30min后分离血清；对温度较为敏感的待测物质如ACTH、INS、C—P等采集与保存应在低温条件下完成；有些血样的采集需加入特殊抗凝剂。对于普通标本，三天内完成检测的置46C保存，否则冰冻保存。标本可置冷水浴中复融，检测前注意充分混匀，应避免反复冻融。
1.3溶血标本影响结果的原因大量红细胞溶解影响被测物质浓度；红细胞内所含酶释放对待测物的破坏作用。脂血标本因脂质影响抗原抗体结合从而影响检测结果。
2仪器维护与保养
2.1 日保养每天检测前清洁仪器表面及桌面，检查系统温度状态、系统液路部分和系统耗材部分是否符合要求，按主屏保养程序进行主针及管路清洗。
2.2周保养做仪器内部清洁工作，清洁主探针外表面。用无纤维刷子清洁孵育带及反应管感应点。用l号杯加碱性溶液，2号杯加稀释酸性溶液，3号杯加去离子水，按主屏程序作系统清洗。
2.3月保养用专用小刷子捅洗主探针、2、4、6号针，清洁底物针外部，同周保养作三杯系统冲洗。然后作系统检测，l号杯加入未稀释系统检测液，2号杯加入清洗缓冲液，3号杯为空样品杯，4号杯加入l：5稀释系统检测液，按操作程序进行系统检测。系统检测数据应在控制范围内，主要数据如下。1号杯：CV of Washed RLUS必须小于等于12％，RLUS均值为5000—20000，如检测结果超出此范围，需要检查RV的清洗与混匀系统功能；3号杯：CV of Substrate RLUS必须小于等于5％，RLUS均值在5000—9000之间，检测结果RLUS值不能有明显衰减，如果有衰减则说明由于吸液针清洗不足导致了交叉污染；4号杯：CV of Washed RLUS必须小于等于12％，RLUS均值为4000000一8000000之间；若检测结果超出此范围。说明系统检测液稀释比例不当或主探针精密度需要检查。
3标准曲线的校正
以下情形需要校正标准曲线：①不同批号试剂之间存在差异，在新批号试剂使用前必须进行定标。②标准曲线过期或质控值超出控制范围。标准曲线漂移是引起发光免疫分析系统误差的原因之一，由于各检测项目试剂稳定性和检测原理不同，标准曲线稳定性差异较大，一般情况下夹心法稳定性好于竞争法。在实际操作中可依据标准曲线的有效期来进行标准曲线的校正，或参照质控结果来决定是否需要校正标准曲线。由于发光免疫分析检测成本较高，为了降低校正频率，节省成本，可计算连续三次中值质控血清结果的均值，如果超出质控均值-t-2s，则需要重新校正标准曲线。③仪器相关部位经过较大维修、配件更换或缓冲液等试剂的升级。
