DNA琼脂糖核酸电泳
核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，可以用于：（1）核酸探针；（2）核酸扩增；（3）序列分析等技术。
| 实验方法原理 | 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行，浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网孔大小不同的凝胶，可用于分离不同分子量的核酸片段。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子； 2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml） ； 3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染料，轻轻旋转以充分 混匀凝胶溶液，倒入电泳槽中，待其凝固； 4. 室温下 30~ 45 分钟后凝胶完全凝结， 小心拔出梳子， 将凝胶安放在电泳内槽； 5. 向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶面 1mm 为宜，如样品孔内有气 泡，应设法除去； 6. 在 DNA 样品中加入 10×体积的载样缓冲液（loading buffer） ，混匀后，用枪 将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内； 7. 接通电源，红色为正极，黑色为负极，切记DNA 样品由负极往正极泳动 ( 靠近加样孔的一端为负) 。一般 60～100V 电压，电泳 20～40min 即可； 8. 根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳； 9. 电泳完毕，关上电源，在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置，并与核酸分子 量标准 Marker 比较被扩增产物的大小。 收起 |
| 注意事项 | 制胶时需均匀融胶，避免影响后续跑胶结果。 |
| 其他 | 除去琼脂糖核酸电泳之外，还可以进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，后者适用于寡聚核酸的分离。 |
