细胞死亡的生化分析实验
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 250 g 离心 5 分钟收集 2X106~5X106 细胞,用 pH 7.2 的冷 PBS 洗 1 次,用 200 μl 溶解缓冲液重悬。 2. 在冰上孵育细胞 30 分钟。 3. 用 Eppendorf 将样品在 13000 r/min 离心 5 分钟,取上样进行 Caspase 活性测定:每种样品留一等份作蛋白质定量。 4. 在水或 DMSO 中溶解底物,配置成 20 mmol/L 的储存液,可在 -20℃ 避光保存。 5. 将反应混合液置微量滴定板中,用带动力学装置的 SpectraMax 微量滴定板分析仪在 405 nm 滤光片下读取反应数据。每 2~20 秒检测样品,确定底物的初始水解率;保证所得底物水解率为线性。 |
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