GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择
在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是
参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
如何选择合适的GAPDH抗体？
内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于GAPDH的检测分子量大约在36kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合做内参。
因为检测的目的蛋白分子量在50kD左右，之前的β-Tubulin不是很适合，就购买了一支Abbkine的GAPDH抗体做内参，效价确实有点惊讶，我用1:1000倍起始稀释觉得条带很浓，后来一直到1:8000稀释，同时减少了曝光时间，条带仍然很清晰。——武汉大学生命科学院一客户
一般来说，内参抗体可检测的种属类型越多，在使用过程中的选择余地就越大；而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl GAPDH抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的GAPDH抗体（假如 WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。
为什么选择推荐Abbkine品牌的GAPDH抗体？
供应GAPDH抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling（CST）、Millipore等都有相关GAPDH抗体提供。但是由于不是专门的标签和内参抗体供应商，因此在性价比上不是最优的选择， 以Abcam为例，其一支100μl GAPDH抗体的RMB报价为￥4418；CST的一支100μl GAPDH抗体的报价是￥2997。
另外，一些国内的供货商也能提供分装的GAPDH抗体，但是在品牌和质量保障上都有不足。国产分装的GAPDH体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的GAPDH抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。如果您想买到一支性价比更高，同时也是原装进口品牌的GAPDH内参抗体，那 Abbkine可能会是您的一个重要考虑选项之一。我们向您推荐Abbkine的GAPHD单克隆内参抗体Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)（货 号A01020）。
该抗体单克隆抗体，克隆号为2B5。其抗原为同时具有蛋白特异性和种属通用性的GAPDH蛋白部分序列，其检测种属非常的广泛，可识别人、小鼠、兔、大鼠、猴、狗、鸡、猪和绵羊的GAPDH蛋白，也算是一个真正保守的内参抗体。另外，该抗体的效价非常高，WB实验推荐稀释比率为 1:1000-1:10,000，甚至有客户报告更高的稀释比率。
