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营养米粉类婴幼儿辅食六种黄曲霉毒素检测

2020.6.29

 

随着毒奶粉、“结石娃娃”、牛奶安全等社会问题的出现,传统婴幼儿食品的安全问题受到全社会的质疑。在乳类制品食品安全问题甚嚣尘上的今天,缺乏关注的婴幼儿辅食类食品的安全性更令人堪忧。近期国家质检总局公布的婴幼儿米粉产品质量显示合格率仅为58.3%!而家长们所迷信的洋品牌的安全“金身”也已告破,近日雀巢等9家欧洲知名品牌的婴儿辅食食品也被发现存在重金属超标等严重危害婴幼儿健康的食品安全问题。

 

婴幼儿时期是人生长发育最重要的时期,也是最脆弱的时期。婴幼儿食品的安全容不得半点马虎。从婴幼儿6个月开始,要逐渐给婴儿加一些除了母乳之外的食物,这些食物就是婴幼儿的辅助食品,简称婴幼儿辅食。辅食的材料大多是米,面为主,蔬果次之,如常见的婴幼儿营养蛋奶米麸、营养米粉等。在如今食品行业困扰于黄曲霉毒素超标的今天,这些产品也必须引起社会和企业的重点关注,企业和国家质检部门有必要加强对婴幼儿辅食中霉菌毒素的检测与监管,保障婴幼儿食品的安全。

 

泰乐祺科技作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的供应商,泰乐祺检测应用实验室重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等问题,针对婴幼儿辅食问题,提出以下解决方案。

 

免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法

 

1. 简介
PriboFast黄曲霉毒素B+G+M免疫亲和柱(编号IAC-014-3或AFT-A01)可选择性吸附样品液中的毒素,从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1、M2浓度,提高检测的准确性和灵敏度。PriboFast AF B+G+M免疫亲和柱是国标GB/T23212-2008(牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定液相色谱-荧光检测法,秦皇岛检验检疫局制定)采用产品。

 

2. 免疫亲和柱/KRC衍生法特点
• 特异性很强使得样品净化效果极佳;
• 使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速,提高检测效率高
• HPLC+FLD, KRC柱后衍生化,有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限
• 衍生化操作方便,光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)。
• 回收率高,达到90%以上


3. 免疫亲和柱法操作步骤简介
1)样品处理(婴幼儿米粉类辅食)

•准确称取25g粉状样品,溶于125ml甲醇/水(70/30)中;

• 振荡器上振荡30分钟(120次/分钟)。也可使用磁转子混匀。

• 将所有上清液3000g离心5分钟,或者过滤;

• 将澄清滤液以1:10溶于0.01M的PBS溶液(pH7),过玻璃纤维滤纸,滤液备用。

2)将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化:经过PriboFast黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2免疫亲和柱(IAC-014-3)活化、淋洗、洗脱三步骤,洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测;
3)测定:HPLC直接进样,经黄曲霉毒素专用色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后荧光检测器直接记录并计算出黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2浓度;

 

Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数(符合GB23212-2008)

PriboFast KRC-25 柱后光化学衍生器          波长:254 nm
HPLC-色谱柱 :黄曲霉毒素专用色谱柱       250 x 4.6 mm; C-18
流 动 相:       水+甲醇+乙腈 11+4+5
流    量:     1.0 mL/min                          柱温:35 °C
进样体积:     100μL
荧光检测器: λ-激发波长:355nm            λ-发射波长:430 nm

 

液相色谱仪检测配置

高效液相色谱仪带有荧光检测器
Pribofast KRC-25 柱后光化学衍生装置,含有1ml反应池,纳米灯管254nm
黄曲霉毒素专用色谱柱 C18 250 x 4.6 mm

 

201222914738.jpg

图中依次为AFM2 M1 G2G1B2B

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