电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂，本期我们来分享如何选择电穿孔的波形，各波形需要设置的参数有哪些？以及两种波形之间的转换
Part 1 方波
方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时，有以下参数要进行考虑：场强、脉冲长度、脉冲个数以及脉冲间隔。
方波-主要用于电转哺乳动物细胞和组织，也可用于细胞融合
场强：两电极间的电压大小，用Kv/cm表示，场强改变一般通过调整脉冲电压或电极间距来实现。
细胞类型
场强范围
细菌/酵母
3-24 kV/cm
哺乳动物细胞
0.25-3 kV/cm
植物
3-12 kV/cm
脉冲长度：单个脉冲持续的时间，脉冲长度与细胞膜穿孔保持开放的时间紧密相关，如时间太长则导致孔径无法恢复；如时间太短则外源物质无法通过细胞膜。
脉冲个数和间隔：是指脉冲的个数以及每两个脉冲之间的间隔。有时为达到优化的分子传递效果，我们可以采用多脉冲。
Part 2 指数衰减波
指数递减波脉冲是先对电容充电，然后让电容完全放电，其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。选择指数衰减波时，有以下参数要进行考虑：场强、电容、电阻、时间常数。
指数衰减波-主要用于电转细菌，酵母，植物（有细胞壁的细胞），有时候对一些哺乳动物细胞也适用
场强：同方波。
电容：容纳电场的能力，用uF表示，释放能量的大小可通过调节电阻来实现。一般我们采用高电压，低电容或低电压，高电容。
时间常数：指数衰减波的脉冲长度，用RC表示，为电阻与电容的乘积。指数衰减波时间常数越大，衰减的越慢，反之则越快。
电阻：阻碍电流的能力，有时又内部电阻和外部电阻之分，如BTX电路则是内部样品电阻与外部设置电阻进行并联，通过调整外部电阻进而来调节总电阻，进而调节脉冲时间。
Part 3 方波与指数衰减波之间如何转换？
如果你查阅文献，只发现有指数衰减波的参数，而你想尝试方波，那怎么办呢？接下来让我们看看这两种波形如何转换吧。
从指数衰减波转换为方波：保持电压/电极间隙/脉冲时间/脉冲间隔不变；
无需设置电容和电阻参数
脉冲长度为指数衰减波时间常数的一半
从方波转换为指数衰减波：保持电压/电极间隙不变
通过调整电阻和电容使时间常数为方波脉冲长度的2倍，
注意：这些转换都是理论上的，通常方波对哺乳动物细胞更有效，指数衰减波对细菌/酵母更有效。
下期预告：电转染小课堂之如何选择缓冲液？
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