液相色谱法检测鲍鱼中糖原含量
糖原又称动物淀粉,作为主要能量贮藏形式,鲍鱼中糖原含量较高,并具有调和浸出物成分的风味,增加浓厚感,使之产生特有风味的作用,鲍鱼的风味品质与糖原含量呈正相关;当受到外界刺激时,鲜活鲍鱼的糖原极易水解,因而糖原含量可作为评价鲍鱼鲜度的指标。鲍鱼中糖原的定量测定对于鲍鱼风味品质质量评价体系的建立具有重要意义。
目前关于鲍鱼中糖原的液相色谱测定方法尚未见报道。文献报道,,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(010)可修饰糖环的还原端,使其具有高度紫外吸收,修饰糖能在反相液相色谱柱上能得到很好的分离,并且衍生过程简便快捷,用于单糖测定非常有效。以液相色谱为基础的多糖的定量方法具有灵敏度高,准确性好的特点。
因此,可利用010作为柱前衍生剂,使用液相色谱法,研究了鲍鱼中糖原含量的测定方法,并对该方法的准确度、稳定性和重现性进行了验证,此法具有准确度高、重复性及稳定性好等优点,可作为水生动物体内糖原含量准确测定的分析方法。
所需检测仪器:
液相色谱仪、二极管阵列检测器,超纯水系统。
色谱条件
色谱柱:分离柱(4.6×205mm i.d,5µm),柱温:25℃。
流动相A:10%(V/V)乙腈+0.1mol/L乙酸铵,流动相B:25%(V/V)乙腈+0.1mol/L乙酸铵。
采用梯度洗脱:0-40min,45%B-100%B,流速:1.0ml/min。
进样量10µL,检测波长:245nm。
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