诊断多发性硬化的好帮手——脑脊液寡克隆带电泳
临床病例
患者，男，41岁，有高血压病史及长期吸烟史，因右侧上下肢体突然无力，口齿含糊，查体：血压150/89mmHg，右侧偏瘫，右侧肌力II级，头颅MRI示：双侧半球皮质下顶叶、额叶多处病灶，诊断为多发性脑梗死，经低分子肝素治疗，病情并无改善。
转院后查体：左右上下肢肌张力增高，反射亢进；化验：脑脊液寡克隆带（+）；进行头颅MRI：双侧半球皮质下白质区顶、额叶，接近脑室周围分布有多病灶，T2加权像高信号，T1加权像为低信号的特点，通过MRI的检查结果，并结合脑脊液生化（寡克隆带电泳）的检测，确诊该患者为多发性硬化（MS），经免疫治疗，病情明显好转并出院。
可见脑脊液寡克隆带电泳在诊断中枢神经系统疾病中的重要性。
小贴士
1、脑脊液寡克隆带是MS患者最常见的免疫学异常表现，是临床诊断MS最有意义的辅助检查。
2、华盛顿大学医学院Avasarala等进行的研究显示，多发性硬化(MS)确诊时,脑脊液中寡克隆区带（OCB）阴性或数量较少者，提示预后较佳。
3、脑脊液寡克隆带对中枢神经系统（CNS）炎性疾病的诊断具有一定参考价值，可作为鉴别CNS炎性与非炎性疾病的可靠实验指标，CNS炎性疾病包括病毒性脑炎、结核性脑膜炎及神经梅毒等。
4、标本需求：同一患者的不抗凝静脉血2ml（黄头凝胶真空采血管）和脑脊液0.5-1ml，血液需在采集后2小时内进行离心2500-3000 r/min 5分钟分离出血清；标本可在冷藏（2-8°C）条件下最多保存一周。
5、如有疑问可联系实验诊断科生化组（TEL:021-31162069）
临床背景介绍
克隆、寡克隆、多克隆概念
体液免疫反应可以根据电泳产生的抗体克隆的数目进行分类。电泳是利用不同蛋白质带的电荷不同在同一电场中泳动速度不同而把蛋白质区分开的方法。
1、单克隆抗体来自单一的浆细胞株，即同一个祖先（浆细胞）分裂，增殖而形成的一簇细胞纯系，同一克隆的B细胞产生同样的均一的免疫球蛋白区带。单克隆反应可能是多克隆反应的开始阶段，此时未发现其他抗体克隆，也可能是检测方法不敏感所致。
2、寡克隆抗体来源于许多细胞株，即电泳上应该有2条或以上区带。寡克隆反应代表对某种特殊抗原或一系列抗原的体液免疫反应，同许多感染、自身免疫和炎症疾病有关。
3、多克隆抗体是所有的免疫球蛋白均增加，在电泳背景下无特殊的可分辨清楚的克隆区带。多克隆代表免疫球蛋白非特异性增加，常与系统性疾病有关，此时对许多抗原产生免疫反应，在神经系统疾病中不多见。
寡克隆带检测原理
脑脊液（CSF）是存在于脑室及蛛网膜下腔内的无色透明液体，是反映CNS疾病的重要指标。正常情况下，由于血脑屏障的存在，其对血液中各种物质选择性的通过，使CSF自身的理化性质保持稳定。病理情况下，由于外伤或炎症等原因导致的血脑屏障功能障碍或CNS内部的异常免疫反应，可导致CNS中免疫球蛋白（Ig）浓度升高或成分发生改变，可以在高分辨率电泳图谱中的γ区出现单克隆带。但在γ球蛋白区域也会出现非Ig蛋白区带，这些区带不具备同等的诊断意义。这种情况下，免疫固定方法能够显示组成蛋白条带的Ig特性，鉴定其中具有常规的诊断意义的IgG寡克隆带。为了确认内源性的合成，必须将同一病人的血清和脑脊液作平行检测，以论证在脑脊液和血清相应部分的差异。脑脊液中寡克隆带的出现往往高度提示有免疫球蛋白的鞘内合成，提示机体存在免疫功能异常。寡克隆带检测可以定性地反映内源性Ig的合成，其定性结果有助于判断CNS疾病血脑屏障功能状态及鞘内免疫球蛋白合成状况，对CNS疾病的诊断及鉴别诊断有重要临床意义。
检测方法
本科室在半自动HYDRASYS系统上对琼脂糖胶片进行等电聚焦，然后用抗-IgG抗血清进行免疫固定。使用标有抗-IgG抗血清的酶只检出真的IgG寡克隆带，因而该分析方法普遍适用于未浓缩的脑脊液标本，具有标本用量少、准确度高等特点。
正常
脑脊液寡克隆区带为阴性
异常
脑脊液寡克隆区带为阳性。
临床意义
鞘内Ig合成的确定是诊断中枢神经疑似炎症疾病的重要信息。IgG鞘内合成的寡克隆图谱或其他指征会出现在不同的中枢神经系统疾病，如：95%的多发性硬化；100%的未治疗神经梅毒；100%的亚急性菌核白质脑病。在众多中枢神经系统病例中，很少发现IgG鞘内合成的现象，它的出现通常与炎症有关，如感染、周围神经病、肿瘤、脑血管疾病等。
注意事项
1、脑脊液和血清标本必须同时从同一患者身上采集。必须避免任何可能改变免疫球蛋白浓度的治疗。
2、脑脊液和血清IgG的浓度必须精确确定，这样可以将用于胶片分析的脑脊液和血清IgG的浓度调整到同等水平。
3、如果IgG的浓度求未知，应将血清稀释300-400倍，且使用纯脑脊液。之后应考虑到IgG浓度的不同，因为这可能会影响图谱的解读。
多发性硬化脑脊液寡克隆区带的研究进展
OCB作为一项敏感性、特异性均较高的提示鞘内Ig合成的指标，多年来一直被推荐用于诊断MS，尤其是仅凭临床表现无法确定诊断时，并且还把OCB阳性定为原发进展型MS的一项诊断标准。有作者认为OCB阴性临床诊断MS较少见，此时在诊断时需持谨慎态度。但国内报道MS患者OCB阳性率多为30%-60%，日本学者报道MS患者阳性率为36%，韩国学者报道韩国MS患者阳性率为31.6％。这些研究结果提示亚洲MS人群OCB阳性率均明显低于西方国家(95％)，因此就亚洲人群来说，对于OCB阴性患者不能轻易排除诊断。另有研究表明MS患者的OCB阳性率、IgG指数及24 hIgG合成率高于其他中枢神经系统炎症脱髓鞘疾病和其他中枢神经系统炎症或非炎症性疾病，并且OCB阳性和OCB阴性MS患者的男女比例、EDSS评分和IgG指数等主要临床特点存在差异。虽然OCB并非诊断MS的特异性指标，目前的研究仍提示其可能对MS的诊断有一定的临床价值，有待进一步深入研究。
