照高效液相色谱法(通则0512)测定固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂),依次用甲醇水(3:1)15ml与水5m冲洗,再用pH值约为9的氨水溶液(取水适量滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH值约为9,待用。精密量取每1ml中约含吗啡对照品0.15mg的5%醋酸溶液1ml,置处理后的固相萃取柱上,以供试品溶液中相同的洗脱条件洗脱,用5ml量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀,作为固相萃取柱系统适用性溶液。精密量取该溶液与对照品溶液各10l,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。固相萃取柱系统适用性试验结果(fs)按下列公式计算应在0.97~1.03之间系统适用性试验结果(fs)=Ax/Cx式中Ax为系统适用性溶液中吗啡峰面积;为对照品溶液中吗啡峰面积Cx为系统适用性溶液浓度;CR为对照品溶液浓度。供试品溶液取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于吗啡1.5mg),置磨口锥形瓶中,精密加入5%醋酸溶液10ml,超声20分钟使吗啡溶解,取出放冷,滤过;精密量取续滤液1ml,置处理后的固相萃取柱上,滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9(上样前,另取同体积的续滤液预先调试,以确定滴加氨试液的量),摇匀,待溶剂滴尽后,用水20ml冲洗至中性,以5%醋酸溶液洗脱,用5πl量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀。对照品溶液取吗啡对照品适量,精密称定,加5%醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的溶液。色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂,以50mmol/L碳酸二氢钾溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸钠溶液-乙腈(2:2:1)为流动相,检测波长为220nm;进样体积10l。系统适用性要求与测定法见阿片含量测定项下。