实例阐述高速逆流色谱法制备酸枣仁皂苷A和B
酸枣仁皂苷 A和酸枣仁皂苷 B是酸枣仁镇静催眠的有效成分之一，酸枣仁为中国药典收载的首选养心安神中药，有补肝、宁心、敛汗、生津之功效，主要用于治疗虚烦不眠、惊悸多梦、体虚多汗和津伤口渴。临床用药及药理实验均证明酸枣仁具有显著的镇静催眠作用。随着社会的发展，人们工作生活的压力越来越大，随之产生的焦虑、失眠等症状也不断地困扰着人们的正常生活，对于养心安神药的研究和开发就日益迫切。今天就和大家一起来了解一种采用高速逆流色谱法，从酸枣仁粗提物中分离制备出高纯度单体酸枣仁皂苷 A和酸枣仁皂苷 B的制备分离方法。
早前采用柱层析及高效液相色谱的方法分离，经反相硅胶柱，碳十八柱，及S印hadexLH-20柱从正丁醇萃取后粗品分离获得酸枣仁皂苷A，或者经反复多次硅胶柱分离获得酸枣仁皂苷 A和酸枣仁皂苷 B酸枣仁皂苷 B。
下面是一个实例：选取乙酸丁酯-甲醇-水在半制备型逆流色谱仪上来分离酸枣仁皂苷提取物。先按5:1:5体积比将上述溶剂组分配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上相和下相分开，取下相作为固定相，上相作为流动相。采用半制备型高速逆流色谱仪，配有NS-1007泵，20mL进样阀，聚四氟乙烯柱，柱容积为240mL，8823A-UV紫外检测器，Yokogawa3057便携式记录仪，FC-95自动馏份收集器。称取100mg正丁醇萃取的酸枣仁粗品采用大孔树脂通过乙醇梯度洗脱获得70%乙醇：水洗脱组分溶解于20mL流动相中待用，进样前，先用固定相存满整个柱子，调整主机转速为800rpm，以2.OmL/min的流速将流动相泵入柱内；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样；然后根据检测器紫外谱图，接收目标成分，其HPLC纯度达到97%左右。
逆流色谱仪能直接进大量粗提样品或合成混合物，分离结果能达到相当高的纯度，甚至能直接接质谱仪等仪器，已广泛应用于生物、医药、环保等领域化学物质的制备分离和纯化。
