质谱在蛋白质组学中的应用实验
方案1 蛋白质和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法
方案2 反相微型层析柱的制备实验
方案3 固定化酶微型层析柱的制备
方案4 用于蛋白质组分析的微毛细管 HPLC 色谱及 ESI —体化装置的制备和使用
方案5 利用 Nano-LC 耦联 MS/MS 分析复杂蛋白质混合物实验
方案6 利用多维蛋白质鉴定技术分析复杂蛋质混合物
方案7 二维色谱和质谱结合分离多肽混合物：离线方法
方案8 通过肽的半胱氨酰化捕获蛋白质
方案9 蛋白质的同位素亲和标签实验
方案10 定量蛋白质组学的体内蛋白质同位素标记实验
方案11 利用脱水胰酶亲和捕获蛋白质实验
方案12 应用分子扫描器进行蛋白质组分析实验
方案13 利用化学印刷法进行肽质量指纹图谱分析实验
| 实验材料 | 冷冻干燥样品 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 校准标准品 基质溶液 甲醇 |
| 仪器、耗材 | MALDI 质谱仪 MALDI 板 |
| 实验步骤 |
1.吸取 0.5ul 的基质溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金属样品板上的样品孔中（为了准确起见，请使用2ul 的移液器）。
2.在基质干燥之前，迅速加入 0.5ul 的标准品或样品到基质中。
3.置于室温条件或 40℃ 的烘箱内约 5 min，让溶剂蒸发以使样品干燥。
4.把金属板转移到质谱仪的真空舱内。
5.以恰好高于离子化阈值的激光能量来「预热」校准标准品，从而获得初始质量图谱。
6.然后，降低激光能量直到获得高质量的图谱。
7.用适合的校准物来获得线性的两点（two—point) 外标校准（参考表 8.9 和表 8.10)
8.对未知样品重复步骤 5 和步骤 6, 并与校准值相比较以获得精确的质量。
9.使用完毕后，用水彻底冲洗 MALDI 板以除去任何可见的晶体，然后再用无棉绒薄纸（例如，Kimwipes 纸）沾甲醇擦拭。
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