PCR循环次数是否越多越好
PCR循环次数通常就是30左右。循环数太多了,虽然可以一定程度的提高产物量,但是由于反应时间过长,有一些非特异产物的扩增也会相应增加,而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异扩增。dNTP也会消耗,如果有某一种dNTP消耗比较大,后续扩增就难免会引起错配。所以如果产物已经足够用于后续分析,一般都不太会过度延长循环次数的。
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PCR循环次数通常就是30左右。循环数太多了,虽然可以一定程度的提高产物量,但是由于反应时间过长,有一些非特异产物的扩增也会相应增加,而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异扩增。dNTP也会消耗,如果有某一种dNTP消耗比较大,后续扩增就难免会引起错配。所以如果产物已经足够用于后续分析,一般都不太会过度延长循环次数的。