尿游离皮质醇(UFC)的检查过程
1、尿样品测定：取万分之一的24h混合尿，用蒸馏水稀释至0.5ml，于10ml抽提管中，加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml，抽提5min，静止片刻弃去上层液，下层二氯甲烷抽提液用水洗2次，每次1ml，摇1min，离心1500r/min 3min，弃去水层，取二氯甲烷提取液双份各1ml（复管），45℃压缩空气吹干，加3H-皮质醇7000cpm/10μl，45℃吹干，各管加0.2ml抗体应用液（1∶3800用1g/L GPS稀释），摇匀置4℃过夜，以下步骤同标准管。
2、标准曲线制作：0，0.1，0.3，0.6，1.0，2.0，4.0ng（各点做复管），各管加3H-皮质醇10ml，吹干，每管加抗体0.2ml，另取四管各加3H皮质醇10ml，分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总脉冲测定管，另二管作非特异性测定（BN%）摇匀后，放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS 0.1ml摇匀，再加2.5g/L DCC 0.5ml（总管T不加）。分离游离与结合物；摇匀4℃停放10min，3000r/min离心10min吸取上清液0.4ml，加到8ml闪烁液中，混旋1min，避光4h后，用液烁计数仪测量。
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