tcep还原二硫键的机理是其中心原子“P”所带的孤电子对能与氧原子形成配位共价结合而具有还原性。反应过程如下式所示:
二硫键是2个巯基被氧化而形成的−S−S−形式的硫原子间的共价键,在蛋白质分子的立体结构形成上起着一定的重要作用。二硫键的断裂通常需要有大量的自由巯基和二硫键交换,三价膦系衍生物由于其较强的还原能力和对二硫键的选择还原性受到很多研究者的喜爱。
而TCEP则是三价磷系衍生物中作用最优的。TCEP对还原二硫键选择性极强,除半胱氨酸外,几乎没有与其它氨基酸的副反应,是被公认的最好的二硫键的还原试剂。