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外植体的选择原则

2022.11.21

(1)选择优良的种质

无论是离体培养繁殖种苗,还是进行生物技术研究,培养材料的选择都要从主要的植物入手,选取性状优良的种质或特殊的基因型。对材料的选择要有明确的目的,具有一定的代表性,以提高成功的几率,增加其实用价值。

(2)选择健壮的植株

选取发育正常的器官或组织,再生能力强,组培易成功。组织培养用的材料,最好是从生长健壮的无病虫的植株上选取发育正常的器官或组织。因为这些器官或组织代谢旺盛,再生能力强,培养后比较容易成功。此现象可能是由于外植体内部的植物激素水平能够在接种后得以维持所致。

(3)选择适宜的部位

植物组织培养几乎在植物体的各个部位都获得了成功,这些部位包括茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的储藏薄壁细胞、花瓣、根、茎、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。但是不同种类的植物以及同一植物的不同器官对诱导条件反应是不一致的,有的部位诱导分化率高,有的部位很难脱分化,或者再分化频率很低。

(4)选择适当的时期

组织培养选择材料时,要注意植物的生长季节和生长发育阶段,对大多数植物而言,应在其开始生长或生长旺季采样,此时材料内源激素含量高,容易分化,不仅成活率高,而且生长速度快,增殖率高。若在生长末期或已进入休眠期时采样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材,这时比较容易形成愈伤组织。百合在春夏季采集的鳞茎、片,在不加生长素的培养基中,可自由地生长、分化;而其他季节则不能。叶子花的腋芽培养,如果在1~2月采集,则腋芽萌发非常迟缓;而在3~8月采集,萌发的数目多,萌发速度快。对于大多数植物而言,应在其生长季节开始时采样。在生长末期或已进入休眠期时取样,外植体可能对诱导反应迟钝或无反应,较难成活。

(5)考虑器官的生理状态和发育年龄

一般认为,生理年龄小的幼嫩组织较生理年龄大的成熟衰老组织具有较高的形态发生能力。随着组织年龄的增加,器官的再生能力逐渐减弱甚至完全失去再生能力。

(6)材料大小的选择要适宜

建立无菌材料时,取材的大小根据不同植物材料而异。材料太大易污染,材料太小,多形成愈伤组织,甚至难于成活。一般选取培养材料的大小为0.5~1.0 cm。如果是胚胎培养或脱毒培养的材料,则应更小。


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