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LSM低光毒性与高分辨率之间的矛盾

2018.8.11

低光毒性与高分辨率之间的矛盾

      LSCM 还面临着高分辨率和低光毒性间相互矛盾难以平衡的问题,提高图像分辨率需要加强荧光信号,增强激光照射功率和时间,这种光的强度通常比一个典型的宽场荧光显微镜荧光灯强度超过 1000 倍以上,从而造成光漂白导致的光毒性,降低染料荧光寿命和样品的存活率等。而在现有的技术制约下,降低光毒性意味着减少激光照射功率和时间,不利于荧光信号的收集。目前,许多新技术如光门控、磷砷化镓混合检测器、高速扫描、光片技术、超高分辨率等,都是以降低背景信号,增强灵敏度,在使用较弱功率激光下提高信号强度为目的。但从总体上来看在降低光毒性等方面的改良还不尽完美,在实际观察中往往很难达到极限分辨率。


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