生化仪器参数的设置(2)

三、测定时间的选择：

对于终点分析,测定时间的选择应充分考虑到干扰的问题。例如:溴甲酚绿法测定白蛋白选用一点终点分析法,白蛋白同溴甲酚绿反应快,在一分钟内基本上反应完全,随着反应时间的延长,α 球蛋白同溴甲酚绿反应形成干扰,因而溴甲酚绿法测定白蛋白,其测定时间应定于1分钟。对于速率分析法,一般用于酶活力的测定,而酶活力的大小是用反应速度来表示

,因而要求在零级反应期内测定反应速率,此时的反应速率不受底物浓度的影响,仅同酶活力大小有关。因此,测定时间应选在零级反应期内。对于一种物质的测定,由于选择试剂和分析方法不同,其测定时间也随之变化,因而对于特定的试剂和分析方法,应先做出反应进程曲线,从曲线上选择最佳的测定时间。

四、样品量和试剂量的选择：

对于不同的全自动生化分析仪,其测定所需的反应液总量不同。例如:荷兰ＶＩＴＡＬＡＢＳＥＬＥＣＴＲＡ分析仪要求反应液总量不低于250μｌ;日立7150型分析仪要求在250～400μｌ之间;日立7170Ａ型分析仪要求在180～380μｌ之间。而试剂厂商给出了样品量和试剂量的最佳比例,根据比例同时缩小或增加用量,同时满足最小的反应液总量。

五、校正点的设置：

对于多数项目的测定,其浓度同吸光度变化基本上成线性关系,选择低、中、高三个校正点可获得满意的准确度。如果只设置一个校正点,尽量选择一个中值校正点。对于有些物质,例如比浊法测定免疫球蛋白,其浓度同吸光度不成线性,因而需要尽可能多设置不同浓度的校正点。全自动生化分析仪的应用,提高了检验质量和速度,为临床作出诊断、决定治疗方案、判断疗效和预后提供了可靠依据,为了使用好全自动生化分析仪,最重要是恰当设置各种分析参数。随着分析方法的提高及试剂的更新,分析参数也随之变化。