液相色谱柱常见问题分析与解决方案
1.使用一段时间后柱压过高：
解决方案：首先查看是否HPLC系统原因，排除系统原因后，原因基本是由于实验过程中杂质在柱中的累积。尽量完善操作条件，做完样品后要及时冲洗干净，如缓冲盐的流动相一定要用高比例的水溶液(如，90％)冲洗完全后再用有机相保存。
2.筛板堵塞与柱头塌陷：
解决方法：如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，小心取下筛板，用5%左右的硝酸溶液超声处理20分钟左右，再用纯水超声20分钟左右，重新装入色谱柱。
3.色谱柱头的填料被样品污染：
解决方法：
如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。
4.色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出：
解决方法：
如确定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。
注意事项：
1.无论何时，必须保证色谱柱柱床不干涸，尤其是进样检测和柱冲洗过程中不能让流动相长时间(30min以上)走空，否则易使色谱柱干涸且带入大量几乎无法排出的气泡，甚至导致柱床局部塌陷或中部开裂。
2.使用与保存时，严禁用力甩，绝对杜绝不小心猛烈撞击或高处掉落，否则，易导致柱床机械性损坏，则再无再生可能。
3.当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净；
4.避免使用高粘度的溶剂作为流动相；
5.进样样品要全溶解；
6.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2～7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围；
7.每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；
8.每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；
9.若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。
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