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断裂-标记免疫电镜技术(2)

2018.6.30

)超薄切片法

步骤:①至⑤同临界点干燥法

⑥1%锇酸,室温固定2h,系列酒精或丙酮脱水,常规电镜包埋。

⑦切半薄片,光镜定位合适的断裂部位,再切超薄切片,铀铅染色,透射电镜观察。

断裂标记法目前文献报告应用较多的是植物凝集素-胶体金免疫标记技术,常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 胶体金免疫标记技术.Con A 能与细胞膜中的甘露糖结合,能标记内质网膜、核被膜以及细胞膜的EF面,有助于糖蛋白在超微结构水平的定位。

为保证实验结果的准确性,每组实验在免疫标记阶段应设立对照组。对照组的设计同第一章 总论中的免疫对照染色。


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