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RNA酶的用途及破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法

2019.3.05

RNA酶又名核糖核酸酶,为白色冻干粉末 ,可以杀灭许多肿瘤细胞系,可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制,可以治疗乙肝。

RNA酶用途说明:

生化研究,测定核酸的结构

RNase 保护检测

去除非特异结合的RNA

分析RNA 序列

水解蛋白样品中的RNA

纯化DNA

此外,它具有显著的细胞毒性,可以杀灭许多肿瘤细胞系,可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制,可以治疗乙肝。

破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法

用强烈变性如盐酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白质, 导致细胞结构破碎,核蛋白由于其二级结构的破坏而从核酸上解离下来。RNA酶可耐受多种处理等,因此可联用上述试剂,从组织中,如富含RNA酶的胰腺中,提取完整无损的RNA。下述实验程序系列利用RNA酶抑制剂和(或)能迅速灭活RNA酶的有关方法从组织或细胞培养物中分离总RNA、核内RNA和胞质内RNA。

RNase酶非常稳定,是导致RNA降解主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase完全失活。为了获得高质量的真核细胞mRNA,必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。


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