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蚕豆坏死病毒病是怎么进行病毒提纯的

2022.11.18

采用以下步骤可以获得病毒的部分提纯:将干燥的病豌豆组织在0.1mol/L的柠檬酸缓冲液(pH为7.5,含0.1%抗坏血酸和1%.Triton.X-100)中匀浆。在匀浆物中加入0.5倍体积的乙醚进行澄清。再加入PEG(分子质量6000u)至4%(W/V),低速离心,然后将沉淀物溶于0.05mol/L的柠檬酸缓冲液(pH为7.5)。再加入0.25倍的乙醚进行澄清。加入PEG至浓度为4%(W/V)和NaCl至浓度为2%(W/V)沉淀病毒。沉淀物再溶于0.05mol/L的柠檬酸缓冲液(pH为7.5)。通过20%蔗糖垫进行高速离心以沉淀病毒,并将病毒离子溶于蒸馏水中。

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