气相色谱法测定内标法测定奶茶中香兰素的含量
香兰素(Vanillin),又名香草醛,是一种广泛使用的可食用香料或医药中间体,可采取内标法测定奶茶中香兰素的含量。
使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱柱所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,是被分析物质的一个同系物。当然,内标物必须能与样品中各组分充分分离并不发生反应。
方法所需仪器与试剂:气相色谱仪,10ul进样针,移液枪;
香兰素储备样(称取香兰素0.5022g,以氯仿定容到50ml容量瓶);
2-甲氧基苯酚储备样(称取2-甲氧基苯酚0.4987g,以氯仿定容到50ml容量瓶);
香兰素未知样,氯仿。
测定方法:
配置标准溶液:以移液枪量取100,200, 300,400ul香兰素储备液 和200,200, 200,200ul 2-甲氧基苯酚储备液 于5ml容量瓶中,用氯仿定容。
配置未知溶液:以移液枪量取200ul香兰素未知液和200ul 2-甲氧基苯酚储备液于5ml容量瓶中,用氯仿定容。
气相色谱条件:进样口:气化温度:250℃, 分流比:10:1;
色谱柱:流速:2.0ml/min;
柱温箱:120℃(保持1min),10℃/min升到200℃
检测器:基座温度:250℃,H2:45ml/min,
Air:450ml/min,N2:40ml/min. 保存。
以以上方法测定标样及未知样,记录实验数据(保留时间及峰面积),做出内标标准曲线,以内标法计算未知样中香兰素含量。