关于侵袭性肺曲霉病的实验室检查

　　1、 涂片显微镜检 最简单的真菌学诊断方法是对临床标本（痰液、支气管肺泡灌洗液）进行直接显微镜检查。过碘酸雪夫染色（PAS）和银染等特殊染色可以更清楚地显示真菌细胞。曲霉感染可见无色、45°分支分隔的菌丝。

　　2、 真菌培养 从无菌部位如血液、胸腔积液、支气管肺泡灌洗液以及活检组织块中分离出条件致病菌常提示肯定的感染,但对痰液等标本则应谨慎解释结果。一次培养结果阳性往往不能确定诊断,必要时应多次重复检查,同时阴性结果并不能排除侵袭性曲霉病。

　　3、 组织病理学 在组织中证实真菌成分的存在是深部真菌感染诊断的“金标准”。确定侵袭性真菌感染一定要具备真菌向组织内侵入、增殖的直接证据。可通过经纤维支气管镜肺活检、经胸壁穿刺活检或开胸活检获取标本,进行病理检查。

　　4、 抗原及其代谢物质检测 与抗体检测相比,抗原和代谢物成分的检测敏感性高、特异性好,能够反映病情的变化,对于免疫功能受损的患者更有价值。体验（血液、支气管肺泡灌洗液）中抗原半乳甘露聚糖（galactomannan,GM）检测是一种较好的方法。GM是曲霉细胞璧上的一种多糖抗原,有甘露聚糖和呋喃半乳糖侧链组成,呋喃半乳糖具有抗原性,采用双夹心酶联免疫吸附（double-direct sandwich ELISA）方法检测。文献报道,GM诊断侵袭性曲霉病的敏感性为80.7%,特异性为89.2%。国内制定的侵袭性肺部真菌感染的诊治原则规定GM两次阳性有临床诊断意义,其缺点是受某些食物或药物的影响可致假阳性结果。另外,还可以采用检测真菌细胞壁成为1,3-β-D-葡聚糖试验（G试验）,可对系统性真菌病的诊断进行筛查。文献报道,如果以≥60pg/ml为诊断阈值,诊断侵袭性真菌感染的敏感性为97%,特异性为90%~96%,所用确诊或高度可疑的侵袭性真菌感染患者在出现明显的临床症状之前,至少有一次血浆G试验结果为阳性。G试验无法区分真菌种类。污染、溶血、血液透析和使用香菇多糖的患者可出现假阳性结果。某些抗菌药物,如多粘菌素E、厄他培南、头孢噻肟、头孢吡肟和磺胺类药物等,有可能导致G试验呈假阳性。