Millipore密理博纯水系统常见问题集（五）
5．细菌对HPLC相关应用有什么影响？
用含有细菌的水制备HPLC系统的流动相，会产生很多问题：
被色谱介质（指色谱柱——译注）截留下来的细菌会增殖，造成阻塞。
细菌会附着在色谱微球表面，覆盖住活性位点。
会造成洗脱时间发生变动。
截流下来的细菌代谢产生的有毒副产品会在分析过程中产生假峰，带来错误的分析结果。
6．什么是内分泌干扰物？它会如何干扰分子生物学实验应用？应如何去除？
内分泌干扰物是一种合成的化学试剂，当被注入生命机体的时候，它们会模拟或者阻断荷尔蒙的作用，干扰机体的正常生物功能。通过改变荷尔蒙水平、阻止或者促进荷尔蒙的分泌或者改变荷尔蒙在机体内部传递的途径，从而影响和干扰这些荷尔蒙所控制的生物功能。以人类内分泌干扰物而知名的化学试剂包括：二乙基乙烯雌酚（雌二醇）、二氧（杂）芑、PCBs、DDT和其他杀虫剂。
如今，很多科学家都在研究内分泌干扰物对人类和其他动物早期发育可能发生的影响。比如正在进行的关于杀虫剂（二氧芑、DDT、阿特拉津等等）对内分泌系统损伤的研究。在这类研究应用中，所有的实验用品中不含内分泌干扰品至关重要。
双酚A是用来合成环氧树脂和聚碳酸酯塑料的单体，在不完全聚合或者塑料老化的时候会溶出，能够模拟雌激素功能。
酞酸酯是一大类增塑剂分子的通称，通过调整添加量可以改变材料的硬度，也是一种内分泌干扰物。
实验室中使用的水纯化系统也有可能通过以下三种方式释放双酚A或者酞酸酯，从而成为内分泌干扰物的污染源：原水中含有这些有机物；纯水系统生产材料溶出；以及纯化介质溶出。最早的Millipak是由聚碳酸酯制造的，会有双酚A和酞酸酯这样的内分泌干扰物溶出，新型的Millipak
Express则是由SAN材料制备，内分泌干扰物溶出量大大降低。
污染物
Millipak Durapore PVDF膜
Millipak Express PES膜
二氯甲烷
28
0.45
双酚A
2.2
0.003
DEHP
0.04
0.04
GC-MS分析结果（单位：ppb） DEHP：聚二乙基己基间苯二酚
如果进一步需要无内分泌干扰物的实验用水，可以购买EDS终端纯化柱（货号：CPSPEDS01）。这种EDS终端纯化柱可以密封低温保存3个月。
7．重金属对细胞培养有什么影响？
答：很多实验已经证明了重金属和聚合芳烃（PAH）的细胞毒素影响
存在于空气，水和土壤中的环境化学污染物在很多方面影响着人类。汽车废气的燃烧所才产生的PAHs，和香烟影响内分泌系统。很多重金属会导致肾衰竭，而汞能移动到大脑导致神经衰弱。
在测试的12种重金属（Al，Ge，Ca，Cu，Pb，Mg，Mn，镍，锡，Zn，硒酸盐和亚硒酸盐）中有四种（Ca，Cu, 镍和Zn）显示了细胞毒性。即使只有1.5M的重金属（Cd, Cu, Ni 和Zn），也能发现有细胞死亡。
因此，推荐使用无离子污染和无有机污染的水来做细胞培养。
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水质监测相关问题
1. 什么是Type III, Type II and Type I 水?
根据水中污染物的类型， 许多国际组织将水质分为3类：Type I 水，Type II水，Type III水。 参数规格如下：
ASTM (美国材料测试协会)
参数
Type I
Type II
Type III
电阻率最小值( MΩ.cm 补偿到 25oC)
18.0
1.0
0.25
总有机碳 (ppb )
10
50
200
钠, 最大值 ( ppb )
1
5
10
氯化物,最大值(ppb )
1
5
10
总硅, 最大值 (ppb )
3
3
500
最大细菌数 (cfu/mL)
10/1000mL
10/100 mL
100/10mL
热源,内毒素 /mL
<0.03
<0.25
NA
CAP (美国病理学会) NCCLS (美国国家临床检验标准协会)
参数
Type I
Type II
Type III
最大细菌数(cfu/mL)
10
1000
NS
pH
NS
NS
5.0-8.0
最小电阻率 ( MΩ.cm@250C)
10
1.0
0.1
最大硅酸盐值 ( mg/L SiO2 )
0.05
0.1
0.1
颗粒
0.22m filter
NS
NS
有机污染物
活性炭
NS
NS
2．是否可以用Anatel A10 TOC检测仪测试自来水中TOC含量？
不可以！
Anatel A10
TOC检测器用紫外光氧化技术氧化TOC。这种技术需要相对纯净的水（至少5兆欧）。一定量的样品在催化剂TiO2存在下被UV光氧化。然后比较最初的和最终的电导率，电导率之间的差异是由于UV氧化TOC引起的。通过复杂的运算法则使得电导率的测量能够表达TOC的含量水平。
3．我的超纯水系统显示电阻率为18.2兆欧，但TOC却超过200ppb，为什么？
答：无离子而有高TOC含量的超纯水是可能存在的。这可以很明显的从下面的实验中看出：往水中加入糖，TOC的含量增加而水的电阻率并不变化。
电阻率是描述水中离子水平的一种参数，而TOC指的是可以氧化的有机物。当然，如果加
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入离子化的有机分子，如乙酸，或甲酸，也可以改变水的电阻率。
0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 0 50 100 150 200 250 300 350 400 TOC RES Time (min) TOC (ppb) / Resistivity x 10 (MΩ.cm)
4．如何测量反渗透水的离子截流率？
离子截流率是产水中离子浓度和原水离子浓度之差与原水离子浓度的比值。
%截流率 = [ (Cf-Cp)/Cf] x 100
Cf = 原水浓度，Cp = 产水浓度
要想精确的测量截流百分比，需要在反渗透柱前后各安装一个电导仪。前者测量原水的电导率，而后者（安装在反渗透膜后面）则测量反渗透产水的电导率。
截流百分比的下降表明反渗透膜被污染了，建议此时适当的清洗或者更换反渗透柱。
5．在取样检测Elix产水中细菌的含量时，需要做什么准备工作？
检查出水口是否放置在排水池中（通常情况下都会放置在这儿）。排水池最容易滋生细菌，并逆着排水的方向生长到出水口，从而污染所取的水样。因此在取样前需要用70%的酒精清洗出水口。
具体步骤如下：
用70%酒精消毒
取样前放水1 L以上冲洗
使用手套
使用无菌型的吸量管等玻璃器皿
取样点附近用燃气火焰保护，防治空气中的细菌污染水样。
6．为什么超纯（Milli-Q）水是酸性的？
超纯（Milli-Q）水不含任何离子而且中性。但是一旦超纯水暴露在空气中，它的纯度会迅速下降。即便仅仅是几分钟，pH值都会明显的下降。这是因为空气中的二氧化碳会与水反应生成碳酸。
碳酸电离释放出来的氢离子（H+）会降低水的pH值。这种反应非常迅速，暴露在空气中的超纯水电阻率会在60分钟内从18.2MΩ.cm下降到4MΩ.cm。因此我们始终提倡Milli-Q水随制随用，而不用容器贮存。
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resistivity (MΩ.cm)10-20-40204060 80 100 Time
7．如何测量超纯水的pH值？
测量超纯水的pH值需要特殊的条件。由于性质比较特别，超纯水被称为世界上最强力的溶剂。水的化学式是一个氧分子加两个氢原子，无色无味。由于绝对的纯水能够溶解任何接触到物质，因此它绝对的纯度是不可能保持的。由于超纯水没有任何缓冲能力（即在溶解其他物质的同时保持自身的pH值），因此最微小的污染也会改变它的pH值。
纯水是一种优良的绝缘体，因此在测量pH值的时候很难让pH计的测量电极和参比电极之间导通。这样在测量用的电极电路中产生极高的电阻，会使得测量的电信号噪声变大，电极的反应变慢，并产生静电双电层（static
buildup）。这种静电双电层在纯水流经塑料管路时很常见。它产生的电场会使得测量得到的电阻比实际值要大。这样测量得到的pH数值是错误的。
测量超纯水的pH计需要用特殊的电极，它接一个金属的、接地的附件。通过接地，增大了整个电路的电容，从而降低了电信号噪声。同时由于接地分流了电荷，使得测量信号的稳定时间增大，也在某种程度上降低了静电双电层的强度。电极的附件还包括凝胶装填的参比电极或者流动的联结点，这可以在测量pH值得时候快速的在连接点两侧建立电位平衡。流过联结点的电解液偶尔会阻塞联结点。将整个测量电路放置在配件旁边，可以让代测样品的电荷释放掉，从而保持测量电极承受的压力稳定。这同样能够解决样品被KCl电解液污染的问题。
8．二氧化碳对超纯水的pH值有什么影响？
超纯水（Milli-Q水）不含任何离子而且中性。但是一旦超纯水暴露在空气中，它的纯度会迅速下降。即便仅仅是几分钟，pH值都会明显的下降。这是因为空气中的二氧化碳会与水反应生成碳酸。
resistivity (MΩ .cm) 10- 20- 4020406080100Time
CO2 + H2O = H2CO3
H2CO3 = H+ + HCO3-
HCO3- = H+ + CO32-
碳酸电离释放出来的氢离子（H+）会降低水的pH值。这种反应非常迅速，暴露在空气中的超纯水电阻率会在60分钟内从18.2MΩ.cm下降到4MΩ.cm。
