临床常用血清酶同工酶及其亚型分析(2)
二、γ-谷氨酰转移酶及其同工酶
（一）生物化学特征
g-谷氨酰转移酶（γ-GT或GGT）又称γ-谷氨酰转肽酶（γ-GTP或GGTP），是一种含巯基的线粒体酶。组织分布以肾脏含量最多，其次为胰、肺、肝等。血清中的γ-GT则主要来自肝胆，红细胞中几乎无γ-GT，因此溶血对其测定影响不大。
（二）测定方法
目前国内外多采用连续监测法测定血清γ-GT活性。IFCC参考方法采用L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺作为底物，以甘氨酰甘氨酸（双甘肽）作为γ-谷氨酰基的受体。在pH7.7的条件下，γ-GT催化底物生成γ-谷氨酰双甘肽和黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸，在410nm波长处直接连续监测，吸光度的增高速率与γ-GT活性成正比关系。
（三）临床意义
γ-GT是肝胆疾病检出阳性率最高的酶。
γ-GT 还可用于判断恶性肿瘤有无肝转移，肿瘤患者如有γ-GT 的升高，常说明有肝转移。
γ-GT与乙醇的摄取量有关，对乙醇性中毒的判定有相当的价值。长期接受巴比妥类药物、含雌激素的避孕药者常有γ-GT升高。
用醋纤膜电泳可将γ-GT同工酶分为γ-GT1、γ-GT2、γ-GT3和γ-GT4四种，正常人只见γ-GT2和γ-GT3。重症肝胆疾病和检验地带网肝癌时常有γ-GT1出现，乙醇性肝坏死和胆总管结石时常有γ-GT2增加，胆总管结石及胰腺炎时γ-GT2也增加。γ-GT4与胆红素增高密切相关。
三、肌酸激酶及其同工酶和亚型
（一）生物化学特性
CK催化肌酸和ATP或磷酸肌酸和ADP 之间的磷酸转移的可逆性反应，所产生的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。CK广泛分布于全身，在骨骼肌含量最高，其次是心肌和脑。测定样品宜用血清或肝素化血浆。
CK是由M和B两类亚基组成的二聚体。在细胞质内存在3种同工酶，即CK-BB（CK1），CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。在细胞线粒体内还存在另一CK同工酶，即所谓线粒体CK （CK-Mt），也称CK4。
（二）测定方法
CK的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度快，约为正向反应速度的6倍，所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法，其中以后者最常用，有两种工具酶及指示酶参与反应。国内外测定CK的参考方法为酶偶联法。其反应原理如下：
CK
磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP
pH6.5
HK
ATP+葡萄糖 6-磷酸葡萄糖+ADP
G6PD
6-磷酸葡萄糖+NADP+ 6-磷酸葡萄糖酸盐+NADPH+H+
可在340nm波长下测定NADPH生成速率而计算CK活性。
临床常规测定CK同工酶多用检验地带网电泳和免疫抑制法，但位置两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定CK-MBmass，可不受溶血和巨CK的干扰。
（三）临床意义
CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。AMI时总CK活性升高显著，约在梗死后3～8h即升高，10～24h达峰值，3d～4d恢复正常。
CK-MM亚型测定对早期AMI的检出更为敏感，一般以CK-MM3/CK-MM1＞1.0作为诊断AMI的标准，但必须排除急性骨骼肌损伤。
四、乳酸脱氢酶及其同工酶
（一）生物化学特征
乳酸脱氢酶（LD或LDH）催化乳酸氧化成丙酮酸，同时将氢转移给辅酶而成为 NADH，依条件不同而有可逆性。反应式如下：
pH8.8～9.8
L-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+
pH7.4～7.8
（二）体内分布
LD是一种含锌的糖酵解酶，广泛存在于人体各组织中，以肝、心肌、肾、肌肉、红细胞含量较多。LD是由两种不同亚基（M和H）组成的四聚体，形成5种结构不同的同工酶，即LD1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3）和LD5（M4）。
