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细菌和噬菌体的遗传分析 4

2020.9.07

(2)重组发生在部分二倍体中;

(3)只出现一种重组子,不出现相反的重组子(如gal-消失,只剩下gal+)。

三、噬菌体遗传分析

噬菌体是指浸染细菌、放线菌以及真菌的病毒。包括温和、烈性两种,都没有细胞结构,由一个蛋白质外壳包围一段DNA或RNA(烟草花叶病毒为RNA病毒)。

1、噬菌体的突变型

1.1、快速溶菌突变型:少量T系列噬菌体(如T2)和大量大肠杆菌混合,涂于固体平板,噬菌体裂解速度越快,出现的噬菌斑越大。野生型r+噬菌斑小,快速生长突变型r-噬菌斑大。

1.2、寄主范围突变型:野生型T2只能浸染B菌株,不能感染B2菌株(用h+表示);T2突变为T2-,产生抗性突变?,既能浸染B菌株,也能浸染B2菌株(用h-表示)。当在含有B/B2的固体培养基上接种h+后,出现半透明的噬菌斑;而接种h-后,出现透明的噬菌斑。

30’溶菌20’溶菌

基因型r+ r-

表现型噬菌斑小噬菌斑大

T1r表示对T1噬菌体产生抗性的大肠杆菌。

2、噬菌体的基因重组

把噬菌体h+r-和大量噬菌体h-r+加入含有大肠杆菌B的完全培养基。两种噬菌体混合造成复感染(一个大肠杆菌中同时进入两种噬菌体)。将大肠杆菌滤下来,收集噬菌体(加氯仿振荡),将少量噬菌体再涂于含有大肠杆菌B和B2菌株的固体培养基中,出现噬菌斑,除预期的半透明大噬菌斑(h+r-浸染造成)和透明小噬菌斑(h-r+浸染造成)外,还出现了半透明小噬菌斑和透明大噬菌斑两种表型。

因为T2噬菌体为烈性噬菌体,当两种T2噬菌体复感染大肠杆菌B时,不和大肠杆菌染色体整合,而在两种噬菌体h、r基因之间和一个基因外侧发生了双交换(单交换后形成一个环,不能复制而死掉),结果形成四种噬菌体h+r-、h-r+、h+ r+和h- r-(后两种为重组类型)。

B菌株B2菌株培养基是鉴别噬菌体性状的工具(如同解剖镜是观察果蝇的工具)。


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