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赛默飞四极杆-Orbitrap™质谱仪开始申报ANTOP奖

2018.9.29

  金秋十月,ANTOP 2018第二期申报工作正在如火如荼的进行,多家科学仪器企业竞相参与申报,这里将为您介绍ANTOP奖项“打榜”产品。

  赛默飞世尔科技公司申报了ANTOPQ Exactive™ UHMR(超高质量数范围)组合型四极杆-Orbitrap™ 质谱仪奖。凭借多年的Orbitrap质谱仪研制经验,赛默飞世尔科技在2018 ASMS上推出了Q Exactive™ UHMR(超高质量数范围)组合型四极杆Orbitrap™ 质谱仪。

  申报理由:

  能在结构生物学和生物制药研究中执行最高质量的非变性完整蛋白质谱和自上而下的分析。Thermo Scientific™ Q Exactive™ UHMR(超高质量数范围)组合型四极杆-Orbitrap™ 质谱仪是首款在单一平台上实现高质量m/z、MS2和psuedo-MS3的灵敏度和质量分辨率均大幅提高的 UHMR MS。

  • 能可靠地分辨较小的质量差异:能分析完整的兆道尔顿(百万质量数)复合物,分辨很小的质量差异,解析关键的配体、修饰和相互作用的,以便更好地理解生物学过程。

  • 节省珍贵的样本:样品往往异常珍贵,且数量有限。通过在36,000高m/z数量级式地提高灵敏度,即便您的样品量极少,您也可以完成高可信度的检测。

  • 能快速地对非变性蛋白进行自上而下的 MS 分析:四极杆中高达 25,000 m/z 的超高质量选择和Injection Flatapole及 HCD 碎裂池中较高的碎裂效率,允许进行非变性蛋白的Top-down分析。

  • 能表征完整的天然蛋白复合物,包括膜蛋白:通过改变源内捕获的能量,该仪器可以为自上而下的测序释放蛋白亚基,也可以通过轻度的激活保留与多个配体相结合的膜蛋白,以便进行完整复合物的分析

  【科学家评价】

  在大型蛋白质如病毒、核糖体和蛋白酶体的分析中,Q Exactive UHMR 质谱仪使从前的不可能变为可能。该系统的最大优势是我们对大型蛋白质组装研究所需的灵敏度和分辨率的显著提升,并且有能力进行 MS/MS 实验。

  —— Albert Heck 教授,Utrecht 大学

  赛默飞世尔科技近些年在非变性质谱上做出巨大贡献。过去,我们所得的分辨率不足以分析带有少量电荷的超大型蛋白质复合体,这对我们是个真正的阻碍。而如今我们已经从非变性高分辨率质谱的近期发展中受益,这是过去不曾预见的。它带给我们关于我们的分子的全新视角,也是一场令人兴奋的转变。我非常激动在将来它会带给我们怎样的变化。

  —Dame Carol Robinson 教授,牛津大学,创始人和首席科学顾问,OMass科技

  对于分析蛋白质复合体却从未或很少测定到的研究者们,Q Exactive UHMR 仪器提供了数量级更高的灵敏度,也提供了更高的分辨能力,在解析抗原相互作用和蛋白质相互作用时传递出未曾预见的细节,这是使用其他方法如晶体学或单颗粒电子显微镜不会总能看到的细节。现在非变性质谱可以为这些结构生物学工具提供补充。

  — Alexander Makarov 研究主任,生命科学质谱,赛默飞世尔科技

  【高性能分析举例】

  卓越灵敏度和质量分辨率:在高 m/z 区域探索结构和异质性

  Q Exactive UHMR 质谱仪产生的高分辨率质谱数据,显示了核糖体颗粒的异质性和固定相诱导核糖体的相关蛋白(SRA)的亚化学计量关联。

  最高丰度的两个 30S 核糖体组分(788.59 ± 0.08 kDa和 850.1 ± 0.10 kDa)具有质量差 ~61.50 kDa。质量 850.09 kDa对应完整 30S 颗粒的预期质量(847.54 kDa)。质量 788.59 kDa可能源于 RS1 蛋白的缺失(预期质量损失 = 61.2 kDa),该蛋白与 30S 颗粒连接松散,通常在结晶前就已经解离。因此,其在高分辨冷冻电镜重建中缺失。组分间 5.16-kDa 的质量差显示 SRA 的存在。化学计量测定表明制剂中〜 22%的 30S 颗粒与 SRA 蛋白结合。大部分 50S 核糖体颗粒的质量为 1389.7±0.15kDa,与不带有茎复合体的 50S 颗粒的预期分子量一致。低丰度的 50S 颗粒也被检测到,质量为 1,431.5 ± 0.65 kDa。

  超高质量四极杆选择性和超高质量范围——超越传统极限

  乙型肝炎病毒衣壳的非变性 MS/MS 分析

  超高质量选择四极杆可用于筛选 m/z 25000 处的 4 MDa HBV 病毒,以便后续碎裂。Q Exactive UHMR 仪器可靠地检测高达 80000 m/z 的离子。在 300 eV HCD 能量下的 4 MDa HBV 衣壳的串联 MS 谱图显示,衣壳蛋白的 240 个拷贝可连续丢失最多 17 个拷贝。排出的单体出现在低 m/z 处,其子离子却具有更高m/z。插入图呈现的是 70000 m/z 处质谱图的放大图,其包含的 HBV 病毒衣壳能够实现基线分离,这些衣壳蛋白损失 14-17 个衣壳蛋白,图中 HBV 病毒衣壳的离子可实现基线解析,其丢失了 14-17 个衣壳蛋白拷贝(占起始质量的 6.5%),也损失了起始电荷中 68% 的电荷。

  GroEL十四聚体的非变性质谱和非变性自上而下分析

  GroEL十四聚体蛋白复合体的非变性 MS1 分析,该蛋白是细胞中众多蛋白质正确折叠所需的一个分子伴侣。使用源内捕获,能够非常有效地将GroEL 14-mer 去溶剂化和碎裂成单体,并且获得剥离的化合物(13-mer 和 12-mer)。

  通过高质量四极杆选择和有效 HCD 碎裂实现AmtB膜蛋白复合体的非变性自上而下分析。

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  邮箱:huilan_liu@antpedia.net

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