杨医师等人在另一个研究中，分析小鼠在遭受革兰氏阳性菌感染后，血液中miRNA表达谱的变化（Hsieh CH et al., 2013）。枯草杆菌（Bacillus_subtilis）、粪链球菌（Streptococcus faecalis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）等革兰氏阳性菌的 lipoteichoic acid (LTA)，以及不同革兰氏阴性菌的 lipopolysaccharide (LPS)，腹腔注射6小时后，以华联小鼠&大鼠 miRNA 芯片（Mouse&Rat miRNA OneArray®）分析小鼠全血 miRNA 的表现，丛聚分析结果如图4所示。注射枯草杆菌的LTA后，miRNA 的表现明显与粪链球菌/金黄色葡萄球菌的LTA 不同，但是 miR-451, miR-668, miR-1902, and miR-1904 这 4 种 miRNAs 的上调表现差异均超过 2 倍。

以 real-time RT-PCR 验证芯片的实验结果，注射 10-μg LTA 6 小时后，只有 miR-1902 表现量有显著的增加，将剂量提高至1000-μg，4 种miRNAs 的表现则增为 3~6 倍（图5A）。分析不同时间点的 miRNAs 变化，在注射 100-μg LTA 后 6 小时，miR-451, miR-1902, and miR-19042表现量有明显的增加，但是在注射 24 小时后，只剩 miR-451 有显著的差异表现；2 小时与 72 小时则与对照组无异（图5B）。

血清中 miRNA 的变化与全血中的实验结果相似，除了在注射 10-μg LTA 6 小时后，miR-1904表现量也有显著的增加（图6A）；此外，注射100 μg LTA 后 2 小时就可以观察到 miR-1902 and miR-1904 表现量的增加，注射 24 小时后，只剩 miR-1902 有显著的差异表现（图6B）。白血球中的 miRNA 表现则没有任何改变（图7A）。

TLR2 receptor knockout 小鼠在接受 LTA 注射后，miR-451, miR-668, miR-1902, and miR-1904 的表现则增为 6~10 倍（图7B），甚至比正常 C567BL / 6 小鼠还高（图7B）。

小结

由上述两篇研究报告的结果，证明了小鼠遭受革兰氏阳性菌或阴性菌感染后，血液中miRNAs的表现有明显的差异，或许可做为细菌感染的早期诊断生物标记。

miRNAs 的发现使我们对于基因表现的调控系统有了新的思维，并帮助我们找到许多疾病的病因。一个 miRNA 分子可以同时调控数十个以上的基因表现，找寻到数个 miRNA 分子的表现变化，就可以为研究带来许多新的视野与方向。利用miRNA microarray 分析 miRNA 表达谱，可快速筛选出许多具有表现差异的 miRNAs ，是研究miRNA 在疾病中所扮演的角色的第一步。再针对个别 miRNA 的深入研究，将有助于了解致病机制，开发新的临床诊断工具甚至是新的治疗方法。

参考文献

(1) Hsieh CH et al. Whole blood-derived microRNA signatures in mice exposed to lipopolysaccharides. J Biomed Sci. (2012) 19(1): 69

(2) Hsieh CH et al. Circulating microRNA signatures in mice exposed to lipoteichoic acid. J Biomed Sci. (2012) 20(2)

(3) Jiang Q et al. miR2Disease: a manually curated database for microRNA deregulation in human disease. Nucleic Acids Research(2009) Jan; 37 (Database issue): D98–104.

(4) Tijsen AJ et al. MiR423-5p as a circulating biomarker for heart failure. Circ Res. (2010) Apr; 106(6): 1035-1039.