董梦秋：Observing Protein Unfolding Using Cross-linker by LC-MS/MS
分析测试百科网讯 2020年9月15日，2020年中国质谱学会质谱网络研讨会（2020CMSS）进行到第二天，由北京生命科学研究所董梦秋研究员、中国科学院生态环境研究中心汪海林研究员、同济大学田志新教授、中国医学科学院药物研究所张金兰研究员；吉林大学药物代谢研究中心顾景凯教授、军事医学科学院放射与核辐射医学研究所马百平研究员；中国科学院长春应用化学研究所宋凤瑞研究员等国内知名质谱界学者为大家带来精彩报告。
北京生命科学研究所 董梦秋研究员
题目：Observing Protein Unfolding Using a New, Fast-reacting Cross-linker Followed by LC-MS/MS Analysis
由北京生命科学研究所董梦秋介绍团队在交联质谱研究中所取得的成果。董梦秋表示，交联质谱的核心是使用交联剂形成蛋白间的共价交联，从而形成不同肽段的相互连接。通过质谱分析后，可以得到各自肽端的分子信息，进而得到蛋白相互作用区域、空间折叠等信息。自建立以来，交联质谱发展迅速，在蛋白质组学中得到广泛应用。仅可以得到蛋白相关信息外，交联质谱技术也可以帮助冷冻电镜技术建立分子模型、定位蛋白二硫键位置、找出蛋白构象状态间的差异等。
尽管交联质谱分析性能强大，但传统的NHS交联剂存在反应慢、易水解反应等问题。为此，团队与合作者共同开发全新DOPA交联剂，利用氨基基团等避免了NHS上述问题。与DSS交联剂对比发现，虽然DOPA得到交联肽段对数量少，但对蛋白的吻合度更好。此外，DOPA交联剂在正常反应条件下，可在10秒钟基本完成交联反应，在0℃低温、酸性条件下反应结合效率更高。利用这些特性，团队成功探索了蛋白动态展开、折叠过程，第一次看到了蛋白构象随时间的变化。
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