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落射荧光显微镜的用途

2021.10.14

  细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

  而落射荧光显微镜与荧光显微镜的主要区别在于落射光装置,新型的落射光装置是从光源来的光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(紫外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射。当滤镜对向光源呈45度倾斜时,波长短的部分则垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本受到激发,这时物镜直接起 聚光器的作用;同时,波长长的部分(绿、黄、红等),对滤镜是可透的,因此不向物镜方向反射。滤镜起了激发滤板作用,由于标本被激发的荧光处在可见光长波区,可透过滤镜而到达目镜观察。荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高,在高放大时比透射光源强。它除具有透射式光源的功能外,更适用于不透明及半透明标本,如厚片、滤膜、菌落、组织培养标本等的直接观察。近年研制的新型荧光显微镜多采用落射光装置,称之为落射荧光显微镜。

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