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(1)加样/稀释误差: 使得标准品不呈梯度。
(2)标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。
(3)引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。
(4)模板中存在抑制物,或模板浓度过高
原国家质检总局 教授