关于环磷腺苷的含量测定介绍

　　照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。

　　1、色谱条件与系统适用性试验

　　用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.01mol/L四丁基溴化铵，用磷酸调节pH值至4.3）-乙腈（85:15）为流动相，检测波长为258nm。取环磷腺苷对照品约10mg，用水5mL使溶解，加1mol/L的盐酸溶液1mL，水浴30分钟后冷却，用氢氧化钠试液调至中性，用水稀释制成每1mL中含0.2mg的溶液，取20µL注入液相色谱仪，主峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求；理论塔板数按环磷腺苷峰计算不低于2000，拖尾因子应小于1.4。

　　2、测定法

　　精密称取本品适量，用水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取20µL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取环磷腺苷对照品适量，精密称定，同法操作，按外标法以峰面积计算，即得。