样品处理

将38克核桃放入一个食品加工机中弄碎，并放入一个带过滤器的100 cc用手指拧紧的容器组合件中。SFE和PSE技术的基本萃取条件如下：

SFE的条件

SFE系统：                                        SFE100C10

流速：                                             7 毫升／分钟

压力：                                             450巴

SFE修饰剂：                                    乙醇（J. T. Baker，HPLC级）

萃取容器：                                      100 cc

萃取温度：                                      50 ˚C

共溶剂：                                          0.5 mL 乙醇

萃取时间：                                      在上述条件下动态萃取40分钟

PSE的条件

SFE系统：                                       SFE100C10

流速：                                             7 毫升／分钟

萃取容器：                                      100 cc

萃取温度：                                      50℃

压力：                                             250 巴

萃取温度：                                      50℃

PSE溶剂：                                       100%己烷

PSE净化溶剂：                                 CO2

萃取时间：                                      动态萃取40分钟；CO2净化/干燥5分钟

SFC的条件

SFC系统：                                       Method Station

流速：                                             3 毫升／分钟

进样量：                                          40 μL

检测：                                             2998 PDA检测器（扫描范围210至320纳米），λmax：295纳米，吸光度补偿

色谱柱：                                          SunFire Prep Silica，5 μm，4.6 x 250 mm

柱温：                                             40℃

共溶剂：                                          甲醇

梯度：                                            时间（分钟）                %共溶剂

0.0 至 6.0                             5

6.0 至 7.0                             5 至 40

7.0 至 10.0                           40

10.0 至 10.1                          5

10.1 至 13.1                          5

反压：                                            120 巴

数据管理

Empower 软件

结果和讨论

从核桃中萃取油以后，收集溶剂（SFE和PSE分别为20mL和280mL）被去掉，然后测试剩余油中的γ-生育酚。图1 所示为γ-生育酚标准品在SunFire Prep Silica色谱上的梯度洗脱（根据上述条件）及其相应的PDA光谱。通过SFC质谱实现了良好的鉴定，采用APCI+ 模式在417.5（γ-生育酚的中波 = 416.69）这一点上产生了强信号（数据未显示）。

图2和图3分别为核桃油萃取物的典型色谱图和SFE和PSE的PDA光谱。

表1 显示了对于每种技术γ-生育酚的定量结果。对照校正曲线分析时，SFE萃取了0.096 mg/mL，而PSE萃取了0.032 mg/mL。