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新冠疫苗接种者体内RBD抗体及中和抗体检测方法和结...

2021.2.22

新冠疫苗接种者体内RBD抗体及中和抗体检测方法和结果分析

新冠疫苗保护性能评估
为了应对新冠疫情威胁，目前已经有很多国家开始了疫苗接种工作，但接种新冠疫苗后，产生的保护效果并不确定，评估新冠疫苗有效性的重要指标之一就是接种者体内中和抗体的含量。针对大规模疫苗接种后的人群，使用简单、快速的胶体金免疫层析法，可快速评估每个接种者体内的抗RBD抗体及中和抗体的水平。

RBD结合抗体

采用胶体金免疫层析技术，通过双抗原夹心法测试RBD结合抗体：取接种疫苗后的血清滴在试纸条加样区，血清会在毛细作用下向前层析，结合垫上的胶体金会溶解，然后和血清一起向前移动。血清到达检测区后，胶体金标记的S-RBD、血清中的抗体与检测线上包被的S-RBD形成复合物，表现为检测线显色，血清中的抗体含量与检测线显色强度成正相关。反应结束后，直接肉眼观察显**况或采用胶体金检测仪进行测试。通过检测线和质控线上胶体金显色强弱，可判断RBD抗体的含量。该方法可检测血清、血浆及其他分泌物中含有可与RBD相互作用的任何抗体，并且此方法不受样本种属及抗体型别的限制。

胶体金免疫层析检测RBD结合抗体

应用场景

血清中RBD抗体筛查、早期患者血清学诊断及疫苗临床效果评价—抗RBD总抗体检测。

测试结果

标记: 胶体金标记S-RBD (b46003P)和胶体金标记兔IgG (0295P)包被: C线为羊抗兔IgG (0295G)，T线为S-RBD (46003P/46005P)

备注：“+++”表示反应很强；“++”表示反应较强；“+”表示反应较弱；“±”反应很弱；“-”表示无反应。

RBD中和抗体

采用胶体金免疫层析法的竞争法测试RBD中和抗体：取接种疫苗后的血清滴在试纸条加样区，血清会在毛细作用下向前层析，结合垫上的胶体金会溶解，然后和血清一起向前移动。血清到达检测区后，胶体金标记的S-RBD与检测线上包被的ACE2结合，并被固定在检测线上，表现为检测线显色，而血清中的中和抗体会与检测线上的ACE2竞争结合S-RBD，从而导致固定在检测线上的S-RBD减少，检测线显色下降。反应结束后，直接肉眼观察显**况或采用胶体金检测仪进行测试。通过检测线和质控线上胶体金显色强弱，可判断中和抗体抑制效果。该方法可检测血清、血浆中可阻断RBD-ACE2相互作用的任何抗体，并且此方法不受样本种属及抗体型别的限制。