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关于培养基的配置介绍

2022.3.01

  1.配料

  配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水调成糊状

  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

  3.调PH

  用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。

  4.过滤

  滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)

  5.分装

  一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

  (1)三角瓶

  若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,最多不能超过150ml培养基/250ml的

  三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。

  (2)试管分装

  液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;

  固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。

  6.包扎

  分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

  7.灭菌

  按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

  基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

  8.摆斜面

  灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

  9.贮存

  培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用

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