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液相色谱仪分析提取含有胭脂红色素的样品

2020.1.06

用液相色谱仪提取含有胭脂红色素的样品,用高效液相色谱仪对样品进行分析,并与红宝石的紫外可见光谱进行比较,进一步验证。

一、仪器设备

高效液相色谱仪,配紫外检测器;

紫外分光光度计;

电热恒温水浴锅;

旋转蒸发器。

二、试剂与材料

胭脂虫红;

甲醇,色谱纯;

重蒸去离子水;

硫酸和乙酸铵,分析纯;

三正辛胺,分析纯。

三、标准溶液配制

准确称取胭脂虫红对照品50.0 mg于100 mL容量瓶中,用重蒸去离子水溶解定容,配成0.50 g/L的标准溶液储备液。

四、样品前处理

用水重复洗涤约20 g的样品,洗涤溶液作为样品溶液。以肉制品为原料,经研磨机将油脂除去三次,加入90毫升无水石油醚,再用热水提取三次,并用组合提取液作为样品溶液。将样品溶液放入分离漏斗中,加入2mL浓盐酸,加入10 mL三辛胺正丁醇溶液(体积积分为5%)中,用摇床反复提取3次。有机相浓缩至10毫升,用10毫升饱和硫酸钠溶液洗涤两次。在分离漏斗中加入50 mL正己烷,用2%(体积分数)氨水萃取3次,取解吸液5mL,收集解吸液,加入乙酸,在减压(40°C以下)下蒸发至干燥,加入水溶解至5mL,过滤膜(0.45μm),将20μl加入高效液相色谱仪

五、色谱条件

色谱柱:XB—C18(4.6mm×250mm,5um);

流速:1.0 mL/min;

进样量:20ul;

流动相:0.02 mol/L乙酸铵和甲醇;

梯度洗脱程序:甲醇20%~35%,0~5 min;

35%~98%,5~10min;

98%,保持6 min;

柱温:25℃;

检测波长:280nm。


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