蛋白浓度太低检测不出来，我该怎么办？

默克生命科学 默克生命科学 3月4日

近期，有关新型冠状病毒的研究将「细胞因子」推至大众面前，他们在阻击病毒的工作中各司其职：

• 初级细胞因子（I 型和 III 型干扰素、IL- 1β、IL-18、TNF-α、IL-6 和 IL-33）对抗病毒信号进行快递响应，奋力阻击，不断招兵买马；

   

• 次级细胞因子（IFN-γ、IL-10 等）在继续病毒清除工作的同时，开启抑制炎症，恢复肺功能的篇章。

如果这一切控制的刚刚好，会是抗病毒路上自身免疫系统的强势反击。

细胞因子免疫研究的瓶颈

在抗病毒之路上，这些英勇杀敌的细胞因子，一般多为组织细胞（主要为免疫细胞）合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白，作用效率极高，在 fg/mL 的极低浓度区间都能发挥重要的生物学作用。

以大名鼎鼎的 IL-17 为例，IL-17 是由活化 T 细胞产生的致炎细胞因子，可以促进 T 细胞的激活和刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞产生多种细胞因子如 IL-6、IL-8、GM-CSF 和 CAM-1，从而导致炎症的产生。

其家族成员 IL-17A，在健康人的血清/血浆中含量低至 0.3 pg/mL，超过了常规蛋白检测方法的皮克级定量下限，达到了飞克级水平。无奈，很多研究者对于部分影响深远又含量极低的细胞因子只能选择放弃检测。

图 1：对于 IFN-γ，IL-17A 等因子，常规 ECL 等检测方法无法准确测得，研究员最终通过 SMC™ 技术解决了这一问题。

（Erenna 为 SMCxPRO™ 的一代设备）^[1]。

蛋白检测「飞克级」时代

默克 SMCxPRO™ 单分子免疫检测技术，在传统的「三明治」抗体夹心反应的基础上，结合独特的洗脱步骤设计和专利的激光单分子检测技术，实现了飞克级（fg）水平的蛋白准确定量，较常规 ELISA 检测灵敏度高 1,000 倍。为您的研究带来前所未有的洞察力，为蛋白标志物的研究提供全新超强动力。

图 2：默克 SMCxPRO™ 单分子免疫检测原理

创领生物标志物新发现

当蛋白的检测与差异表达对您的科研发现意义重大，那么选择一个值得信赖的超高灵敏度检测平台将极大程度加速研究进程，确保数据可靠性。日益精准的研究和药物研发同样需要平台具备更为灵敏的靶标检测与更高通量的样本检测能力。

默克 SMC™ 技术可实现低丰度蛋白的准确定量，无论是在生物标志物全新价值发现，还是疾病相关生物标记物的发现与应用上已有丰富应用。

应用方案一

传统生物标志物的全新价值

心肌肌钙蛋白 I（cardiac troponin，cTNI）是心肌肌肉收缩的调节蛋白，在心肌损伤时，由心肌细胞释放到血循环中，因此常用于急性胸痛病人的诊断。对 cTNI 的研究也一直停留在患者检验方向。

SMC™ 方法上市后，研究人员首次在健康人血液中发现这一因子，通过对对 350 位正常个体进行检测统计后发现，80% 个体 cTNI 本地水平低于 4 pg/mL。随后 12 年的临床追踪，发现本底表达 cTNl 较高的个体倾向于较高的累积心脏病发病率。通过 cTNI 本底水平检测可提前 12 年对个体患病率进行有效预测。

图 3：cTNI 本底表达水平与个体心脏病患病率成正相关^[2]。