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消除ELISA假阳性的改进措施

2017.9.01

  当你拿着化验单询问医生,他/她却告诉你需要做更多检查,你的心情想必更加焦虑。例行公事的医学检查好比针对潜在疾病的一场排雷竞赛。医生和患者们都如履薄冰,尽管执行了正确的检验,但其结果却错误地把不具备阳性症状的人检测为了阳性结果,即假阳性。

  统计上,假阳性的实质性危害有限,病人通常需要接受额外的抽血等侵入性检查,虽然最终判定之前的诊断结果是假的,但心理损害已然发生,况且据报道,每年因错误检验报告而浪费的测试和流程费用高达数十亿美金。

  “这是医疗保健系统的一大漏洞,”UCSB的研究员Tracy Chuong说。

  提高医疗筛查的准确性,减少误报是Chuong和UCSB化学和生化教授Martin Moskovits和Galen Stucky,以及斯坦福化学工程教授Tom Soh的共同目标。

  为此,他们设计了一种更高精确度、更少等待时间的生物医学检验手段(表面增强拉曼散射术,surface-enhanced Raman spectroscopy),极大地改善了现今比较流行的酶联免疫吸附试验(ELISA),适用于怀孕、过敏、传染病等与蛋白质有关的生理检测。这一成果发表在最近的《PNAS》杂志。

  ELISA法的基本原理是:将血液或其他体液样本滴在表面附有抗体和蛋白质的小盘内,使盘中一种靶向“报告物分子”的结合物被激活,如果目标蛋白存在,通常小盘上的试纸会变颜色。

  “我们发现,这个实验归根到底取决于结合物和报告物,”Chuong说。“如果报告物碰巧与其他蛋白结合了,那么最终对目标蛋白浓度的报告结果就会出现异常。同时,样品中也可能存在其他底物促使报告物的异常激活。”

  解决这一问题的关键技术是纳米金颗粒,它们的电磁性能增强附近任何分子的化学特征。

  把金颗粒聚集起来,当有光线击中它们的表面就会形成小磁场,附近结合物上的化学标签就会被其放大。

  如此一来,结合位点与其他区域的差异会更加明显,足以让人辨认真阳性和假阳性。

  与传统的酶联免疫试验相比,该方法已达到“临床标准”,具有清除假阳性的能力,从而减少了反复试验的必要性。

  此外,该方法还可减少许多操作步骤,纳米金颗粒可在1小时内结合并标记所有待检蛋白。

  该项目的进一步目标是“同时评估多个指标”。

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