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吞噬功能实验——人巨噬细胞吞噬功能测定

2019.4.06
实验方法原理巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。
实验材料

人巨噬细胞

试剂、试剂盒

乙醇瑞士-姬姆萨染色液

仪器、耗材

离心机培养箱

实验步骤

一、材料准备
 

1.  斑蟊浸液制备:斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂,室温下浸泡2周后使用。


2.  人巨噬细胞的获取:取滤纸片蘸斑蟊酊,置于一侧前臂皮肤上,在滤纸片上盖一塑料片,再以清洁纱布固定4~5小时,取下滤纸片,再用塑料瓶盖将局部罩上,以防形成的水疱破裂,48小时即可形成完整的水疱。

 

二、实验步骤
 

取水疱渗出液0.5 ml,加5%鸡红细胞悬液0.01 ml

混匀,置37℃水浴30分钟(每10分钟轻轻摇晃一次)

1000 r/ min 离心5分钟,弃上清,留少许液体混匀细胞,涂片

用甲醇溶液固定后,用瑞士-姬姆萨染色,油镜观察

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注意事项

1.  细胞涂片要轻,以免推破巨噬细胞。涂片不可过厚或过薄,以免影响观察结果。


2.  斑蟊酊剂皮肤炎性渗出液大多再1 ml,最多的可达6 ml,渗出液中所含巨噬细胞平均为30%~40%,最多可达80%。

3.  抽取水疱液时,将皮肤消毒后,用无菌注射器抽取,盛于无菌试管中;局部敷以无菌纱布,24小时后取下纱布。用此方法病人无痛苦及不良反应。

其他

巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。


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