气相色谱法检测稻米中久效磷的残留量

　　一、目的

　　1、了解稻米中久效磷残留量的测定原理。

　　2、学会气相色谱仪的使用方法。

　　二、原理

　　久效磷属有机磷化合物，在富氢焰上燃烧时会以氢磷氧形式放射出特征光，采用磷型火焰光度检测器检测特异性极强。稻米样品中久效磷采用丙酮作为提取剂进行索氏提取，石油醚液液分配净化，二氯甲烷萃取，浓缩后气相色谱磷型火焰光度检测器检测。

　　三、仪器与试剂

　　气相色谱仪，磷型火焰光度检测器，索氏抽提器，旋转蒸发器。

　　久效磷标准储备液：准确称取久效磷标准品，用无水乙醇配成浓度约1mg/ml。久效磷标准使用液：根据所用仪器的灵敏度将久效磷标准储备液用无水乙醇稀释至适宜浓度。

　　丙酮、石油醚、二氯甲烷、无水乙醇、氯化钠、无水硫酸钠。

　　四、实验步骤

　　1、提取

　　称取约40g粉碎稻米样品，置于索氏抽提器滤纸筒中，加入100ml丙酮，于67～69℃水浴回流提取6h，提取液经50℃水浴旋转蒸发器上浓缩并定容至3～5ml，待净化。

　　2、净化

　　待净化提取液倒入250ml的分液漏斗中，加入100ml的1%硫酸钠溶液，混匀，用石油醚(每次25ml)分4次洗，弃去石油醚层。加入25ml饱和氯化钠溶液，再用二氯甲烷(每次25ml)萃取4次，合并二氯甲烷层，于40℃的水浴旋转蒸发器上浓缩近干，用无水乙醇溶解并定容至0.5ml，待气相色谱分析。

　　3、检测

　　(1)色谱柱 玻璃柱，内径3mm，长1m，内装40g/L OV-210/chromosorbWAWD-MCS(80～100目)。

　　(2)温度 柱温185℃，气化室和检测器温度240℃。

　　(3)气体流速 载气：氮气100ml/min；空气：200ml/min；氢气：150ml/min。注意事项：

　　1.国际上多用乙腈作为有机磷农药的提取试剂及分配净化试剂，如AOAC，FDA等采取与有机氯农药提取净化大致相同的方法来提取，净化有机磷农药，即用乙腈或石油醚提取，用乙腈/水分配或乙腈/石油醚分配等方法净化。但乙腈毒性大，价格贵，且不易购买，故本法采用二氯甲烷提取，并在提取时根据样品性状加适量无水Na2SO4、中性氧化铝、活性炭以脱水、脱油、脱色，基本上一次完成提取、净化的目的。另有用各种吸附柱(如弗罗里矽土柱、活性炭等)或用扫集共蒸馏方法净化。 2.分析测定有机磷农药时，由于农药的性质不同，故应注意担体与固定液的选择，

　　一般原则是：被分离的农药是极性化合物，则选择极性固定液；若被分离的农药是非极性化合物，则选择非极性固定液，若选择前者，各农药的出峰顺序一般为极性小的农药先出峰，极性大的农药后出峰；若选择后者，则按沸点高低出峰，低沸点的化合物先出峰。

　　3.有些热稳定性差的有机磷农药如敌敌畏在用气相色谱仪测定时比较困难，主要原因是易被担体所吸附，同时因对热不稳定而引起分解。故可采用缩短色谱柱到1-1.3m，或减小固定液涂渍的厚度和降低操作温度(如本法)等措施来克服上述困难。