高效液相色谱仪在检测食品的应用

一、高效液相色谱仪(HPLC)是色谱的一个重要分支，它以液体为活性相，选择高压输液系统作为分析分离技术。高效液相色谱仪(HPLC)分析的样品是液态的，不受样品挥发性的限制。用高效液相色谱仪可分离和分析约80%的已知有机化合物。现在，高效液相色谱仪广泛运用于别离、剖析、纯化有机化合物等方面。高效液相色谱仪在食品检测中也起着非常重要的作用。综述了高效液相色谱仪(HPLC)在食品检测中的应用。

高效液相色谱仪(HPLC)在食品添加剂检测中的应用，是指为提高食品质量、色泽、香气和口感，以及满足防腐剂、保鲜和加工技术的需要而在食品中添加的人工成分或天然物质。食品添加剂可分为防腐剂、着色剂、甜味剂、抗氧化剂等。食物增加剂有必要在合理的运用范围及运用量内运用，才干确保不会给顾客健康带来损害。

在防腐剂测定中常用的防腐剂是苯甲酸、山梨酸及其钠盐。其适用范围和数量应按照“GB2760-2011国家食品安全守则”[1]的规定进行。采用高效液相色谱仪测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量。采用C18柱，甲醇-醋酸铵混合溶液为流动相，紫外检测波长230  nm，对不同样品采用不同的预处理方法。采用高效液相色谱仪(HPLC)对其进行定量分析。苯甲酸、山梨酸和糖精钠的检出限分别为1.8  mg/kg、1.2 mg/kg和3.0 mg/kg。

建立了高效液相色谱仪(HPLC)测定食品中脱氢乙酸的方法。样品预处理以醋酸锌溶液和铁氰化钾溶液为沉淀剂，甲醇-醋酸铵混合溶液为活性相，C18柱，紫外检测波长290 nm。该方法简化了样品前处理，分离度高，回收率好。

着色剂的测定是为了使食品具有令人愉悦的色泽，增加对食品的味觉和影响食欲，着色剂常被添加到食品中。着色剂分为天然组分和人工组分，着色剂的主要原料是化学制品。人工食品色素的超标准使用将严重损害人们的健康。因此，组成着色剂的运用，有必要契合GB2760-2011食物安全国家规范   食物增加剂运用规范要求[1]，按规范规则范围定量运用。在GB/T5009.35-2003食品中组分着色剂的测定中，采用高效液相色谱仪[4]。采用C18柱、甲醇-氨乙酸酯混合溶液为活性相、梯度洗脱和紫外检测器254nm波长，可以确定新的红色、柠檬黄、紫红色、靛蓝、洋红、日落黄、亮蓝。有8种由红苔红组成的着色剂。

对甜味剂的测定  乙酰磺胺酸钾（安赛蜜）、糖精钠、阿斯巴甜都是甜味剂，因其不同特性作为甜味剂被增加在不同食物中，对其运用范围和定量，在  GB2760-2011食物安全国家规范  食物增加剂运用规范[1]中有明确规则。采用VP-ODS色谱柱，二极管阵列检测器，硫酸铵：甲醇：乙腈：10%硫酸混合溶液800-150-49-1为流动相，检测波长为214  nm，以硫酸铵：甲醇：乙腈：10%硫酸为流动相，检测波长214  nm。建立了HPLC法同时测定饮料中氨胺、糖精钠和阿斯巴甜的方法。该方法回收率较好，相对标准偏差小于1％。以上三种甜味增加剂在饮料中的检出限分别为0.4mg/kg、0.6mg/kg  、0.5 mg/kg。

对食物抗氧化剂的测定   抗氧化剂作为食物增加剂可以协助对立食物变质、进步食物稳定性和延伸食物的贮存期。食物中抗氧化剂的增加用量有必要妥当，不然会对人体健康形成损害。维生素C是一种常见的抗氧化剂。建立了高效液相色谱法(HPLC)测定奶粉中维生素C的方法。采用C18柱，二极管阵列检测器，磷酸二氢钾为活性相，回收率较好，相对标准偏差为3.96%~7.81%，检出限为5  mg/kg。

二、黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生黄曲霉的有毒代谢产物。当食物储存不当时，黄曲霉毒素容易产生黄曲霉毒素。黄曲霉毒素是一种剧毒真菌毒素。它已被世界卫生组织列为第一类致癌物。“林裕.建立了高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的方法，采用ALLSPHERE  ODSLENGTH 250×416 mm柱，以乙腈-水(梯度洗脱)为流动相，荧光检测器：激发波长360 nm，发射波长440  nm。B1、B2、G1和G2的低浓度为0。20μg/kg，0。05μg/kg，0。20μg/kg和0。05μg/kg。样品经纯化、衍生化后，荧光检测器检测到的浓度是国标法的10倍[8]。

丙烯酰胺常出现在油炸后含有碳和水的食物中(如炸薯条、薯片)。研究表明，丙烯酰胺具有神经毒性作用。(IARC)，一个世界癌症研究组织，于1994年评估了其致癌性。丙烯酰胺可分为人类致癌物(2A)和致癌物(2A)，主要是根据丙烯酰胺在动物和人体内的代谢转化为其致癌活性代谢产物环氧丙酰胺。柳其芳等人建立了高效液相色谱仪-二极管阵列检测法测定食品中丙烯酰胺的方法[9]。方法采用反相C18柱，流动相为甲醇-水，二极管阵列检测器，扫描波长范围190~370  nm，检测波长210 nm。丙烯酰胺在0.1~10 mg/L浓度范围内具有良好的线性关系，检出限为10  ng/g，可用于食品中丙烯酰胺的痕量分析。

三、食品中瘦肉精华的测定是近年来被广泛重视的一个术语。事实上，它的化学名称是盐酸克伦特罗。它既不是一种兽药，也不是一种饲料添加剂，而是一种肾上腺神经兴奋剂。盐酸克伦特罗被增加在饲料中用以进步猪的生长速率和瘦肉比例，人食用了含有盐酸克伦特罗的猪肉后会呈现中毒的反应。长期以来，中国一直禁止在饲料和动物饮用水中使用克伦特罗，但仍有报道称，食用含有克伦特罗残留物的猪肉和内脏会导致中毒。建立了一种高效液相色谱仪测定动物食品中盐酸克伦特罗的方法。方法采用HypersilC18色谱柱，流动相为甲醇-0.01mol磷酸二氢钾溶液，检测波长209  nm。样品中克伦特罗的小检出量可达0.20 ng，简便实用。可用于商场的监测和食物中毒样品的溯源检验。

四、近年来，在食品中检测到非法添加的苏丹红，许多食品中都检测到苏丹红，这是众所周知的，因为它具有致癌性。苏丹红是一种化学染料，不是食品添加剂。对人肝肾等器官有明显的毒性作用。采用高效液相色谱仪(HPLC)检测苏丹红。李军等人建立了以乙腈-酸性水溶液为流动相，二极管阵列检测器梯度洗脱的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定食品中四种苏丹红色素的方法[11]。检出限分别为0.102  mg/kg、0.097 mg/kg、0.074 mg/kg和0.099 mg/kg。

三聚氰胺是一种有机化合物，常被用作化工原料，不能食用。在摄入人体后会形成肾结石并堵塞肾小管，甚至有或许导致肾衰竭。由于惯例的食物中蛋白质的检测办法不能将其区别出来，不法商人将其掺入食物中，用来进步食物检测中的蛋白质含量目标。在有毒奶粉事件爆发后，国家迅速制定了GB/T22388-2008乳制品中三聚氰胺检测规范[12]，其中第一种方法是采用高效液相色谱仪(HPLC)，采用C8或C18柱。离子对试剂缓冲液和乙腈混合溶液作为活性相，紫外检测器或二极管阵列检测器在240  nm下的回收率在80%~110%之间，检出限为2mg·kg~(-1)·L~(-1)，检出限为2mg·kg~(-1)。